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茶碱、咯利普兰和acetamide—45对gl62酵母细胞表达的人磷酸二酯酶4a的抑制作用

目的:研究gl62酵母细胞中磷酸二酯酶4a(pde4a)的诱导表达和茶碱、咯利普兰、n-对氟苄基-3-[(n-4-吡啶)-乙酰胺]-吲哚45(acetamide-45)对gl62酶母细胞诱导提取物中pde4a活性的抑制作用。方法:克隆了人pde4a基因的gl62酵母细胞在cuso4 150μmol/l条件下诱导表达pde4a并提取,用高效液相色谱法测定pde4a的活性。结果:gl62酵母细胞在cuso4诱导下的表达产物蛋白分子在62kda和83kda之间,表达产物的pde4a的活性在3h达到最大为(188±23)μmol·g^-1·min^-1,其米氏常数km为(17.7±2.6)μmol·l^-1.茶碱,咯利普兰和acetamide-45对诱导提取物pde4a活性的ic50(95%可信限)分别为1642(989-2727),4.58(3.45-6.08)和275(170-444)μmol·l^-1。结论:gl62酵母细胞经cuso4诱导可表达pde4a,茶碱、咯利普兰和acetamide-45能抑制其活性,gl62酵母细胞的诱导表达提取物可用来研究pde4a及其抑制剂。完成机构:浙江大学医学院国家药品监督管理局呼吸药物研究实验室,杭州310031,中国
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