neb t4 dna连接酶(ligase)将连接以下底物：
neb t4 dna连接酶(ligase)的特性和用法：
浓度：400000个内聚端基单位/ml和2000000个内聚端基单位/ml
反应条件：1x t4 dna连接酶反应缓冲液；在16°c条件下培养。
1x t4 dna连接酶反应缓冲液：50 mm tris-hcl、10 mm mgcl2、1 mm atp、10 mm dtt(ph 7.5 @ 25°c)。
贮存溶液：10 mm tris-hcl、50 mm kcl、1 mm dtt、0.1 mm edta、50% glycerol（ph 7.4 @ 25°c）。
热失活：65℃10min。
neb t4 dna连接酶(ligase)的应用特性：
★限制性片段的克隆
★将连接体和适配器连接到钝端dna
neb t4 dna连接酶(ligase)使用时的注意事项：
（1）atp 是反应中必不ke少的辅因子。这与需要 nad 作为辅因子的e. colidna 连接酶不同。
（2）若需稀释 t4 dna 连接酶，推荐使用含 50% 甘油的贮存缓冲液（稀释缓冲液 a，neb #b8001s）稀释，然后于 -20℃ 贮存。如稀释后立即使用，也可以使用 1x t4 dna 连接酶反应缓冲液稀释。
（3）连接反应可以在添加 1 mm atp 的四种限制性内切酶缓冲液的任何一种或在 t4 多聚核苷酸激酶（t4 pnk）缓冲液中进行。
（4）为方便起见，连接可在室温（20 - 25℃）条件下进行。连接粘性末端，在 20 µl 反应体系中加入 1 µl t4 dna 连接酶，反应 10 分钟。连接平末端，在 20 µl 的反应体系中加入 1µl 的 t4 dna 连接酶，反应 2 小时；或者加入 1 µl 高浓度的 t4 dna 连接酶反应 10 分钟。此外，也可选择 neb quick ligation 快速连接试剂盒（#m2200s）[30 次反应] 或（#m2200l）[150 次反应]），在室温条件下反应 5 分钟，即可完成 dna 平末端和粘性末端的连接。
neb t4 dna连接酶(ligase)产品订购信息：
产品名称
货号
储存温度
数量
浓度
t4 dna连接酶
m0202vvial
-20℃
1 x 0.025 ml
400,000 units/ml
t4 dna连接酶反应缓冲液
b0202svial
-20℃
1 x 1 ml
10 x
t4 dna连接酶
m0202svial
-20℃
1 x 0.05 ml
400,000 units/ml
t4 dna连接酶反应缓冲液
b0202svial
-20℃
1 x 1 ml
10 x
t4 dna连接酶
m0202tvial
-20℃
1 x 0.01 ml
2,000,000 units/ml
t4 dna连接酶反应缓冲液
b0202svial
-20℃
1 x 1 ml
10 x
t4 dna连接酶
m0202lvial
-20℃
1 x 0.25 ml
400,000 units/ml
t4 dna连接酶反应缓冲液
b0202svial
-20℃
1 x 1 ml
10 x
t4 dna连接酶
m0202mvial
-20℃
1 x 0.05 ml
2,000,000 units/ml
t4 dna连接酶反应缓冲液
b0202svial
-20℃
1 x 1 ml
10 x
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