主要用途
纯化核糖体（ribosome）蛋白质萃取试剂是一种旨在通过化学和有机溶剂处理，去除rna成分，获得完整而纯化的核糖体蛋白系统的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种纯化核糖体（动物、人体、植物、细菌等）的蛋白质预制备。可直接用于特定蛋白后续纯化、蛋白一维或二维电泳、西方杂交、免疫抗体和质谱分析等等。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。
技术背景
核糖体（ribosome）是一种细小颗粒的核糖蛋白复合物（ribonucleoprotein complex），生命细胞制造蛋白质的非膜性结构元素和转译装置（translational apparatus），由rna和蛋白质组成，具有多肽转移酶的活性。其分成2个亚体：大亚体和小亚体。核糖体通过大亚体结合转运核糖体（trna），而小亚体结合信使rna（mrna），然后阅读rna提供的信息，转译（translation）成氨基酸，连接成蛋白分子。真核生物的核糖体位于胞质（游离核糖体）、线粒体和叶绿体中。其中胞浆核糖体为80s核糖体，由40s小亚体和60s大亚体组成：60s由5s rna、28s rna、5.8s亚基和49个蛋白组成；而40s由18s rna和33个蛋白组成。线粒体和叶绿体核糖体与原核生物相似，为70s核糖体，由30s小亚体和50s大亚体组成：50s包括5s、23s rna和34个蛋白；30s包括16s rna和21个蛋白。
产品内容
缓冲液（reagent a） 毫升
清理液（reagent b） 毫升
沉淀液（reagent c） 毫升
萃取液（reagent d） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里；试剂具有腐蚀性和挥发性，注意操作安全和密闭瓶盖；有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管：用于样品操作的容器
15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
（微型）台式离心机：用于样品操作
涡旋震荡仪：用于混匀
实验步骤
1．从－70℃冰箱里取出核糖体颗粒样品，放进冰槽里
2．（选择步骤）如果核糖体样品不是颗粒状态，使用适量的缓冲液（reagent a），调整到1毫升体系
3．（选择步骤）加入xx微升清理液（reagent b），混匀
4．（选择步骤）放进4℃（微型）台式离心机离心10分钟，速度为10000g
5．（选择步骤）小心抽去上清液
6．加入xx微升缓冲液（reagent a）到核糖体颗粒样品中，混匀颗粒群
7．加入xx微升沉淀液（reagent c），混匀
8．放进冰槽中孵育60分钟，期间每隔15分钟涡旋震荡60秒
9．放进微型台式离心机离心10分钟，速度为16000g（或13000rpm，例如eppendorf 5415）
10．小心移取800微升上清液到新的15毫升锥形离心管
11．加入xx毫升萃取液（reagent d），混匀
12．放进—20℃冰箱里，孵育2小时
13．放进台式离心机离心10分钟，速度为10000g
14．小心抽去上清液
15．加入xx毫升萃取液（reagent d）
16．放进－20℃冰箱里过夜
17．放进台式离心机离心10分钟，速度为10000g
18．小心抽去上清液
19．加入xx毫升清理液（reagent b）
20．放进－20℃冰箱里孵育30分钟
21．放进台式离心机离心10分钟，速度为10000g
22．小心抽去上清液
23．空气中挥干
24．若暂时不予后续处理，保存在－20℃冰箱里
25．或继续进行后续操作，例如电泳，质谱等
注意事项
1．本产品为20次操作
2．操作时，须戴手套
3．试剂具有腐蚀性和挥发性，注意操作安全和密闭瓶盖
4．推荐使用系列核糖体分离试剂盒提取核糖体
5．本公司提供系列核糖体试剂产品
质量标准
1．本产品经鉴定性能稳定
2．本产品经鉴定无蛋白酶污染
3．本产品经鉴定蛋白萃取产量高
4．本产品经鉴定纯化程度高
关键词：台式离心机 离心机