开坦尼 （卡度尼利单抗注射液，下面简称c药）是康方生物（港股，09926）自主研发的pd-1/ctla-4双特异性肿瘤免疫治疗药物，已于2022年6月29日获得国家药品监督管理局的批准，用于既往接受含铂化疗治疗失败的复发或转移性宫颈癌患者的治疗，成为首款获批上市的国产双抗药物，也是全球首款获批的肿瘤双免疫检查点双抗产品。根据康方生物发布2022年财报， c药上市仅6个月销售额就达到了5.46亿元，说明该药物具有良好的药效。近期康方生物发文章公布了对于该抗体的药理研究[1]，陈老湿认为该药物有以下创新点：
01
pd-1/ctla-4抗体组合选择
pd-1和ctla-4在很多肿瘤中是共表达的，而且利用了til（肿瘤浸润淋巴细胞）与外周血淋巴细胞中pd-1/ctla-4共表达的差异，使得这款新药只富集在肿瘤微环境中，减少了传统免疫治疗的毒副作用问题。抗肿瘤效应更特异还有一个可能原因是这款药物可以连接特异表达pd-1或ctla-4的肿瘤细胞。
图1：流式细胞实验发现，c药可以连接表达pd-1 cho细胞和表达ctla-4的cho细胞（右上门的百分比），并且呈浓度依赖性
图2：octet® 非标记分子互作系统实验发现，分子水平上c药可以同时结合pd1和clta4，左图为先结合pd1再结合clta4，右图为先结合clta4再结合pd1
02
c药为四价结构与两价的双特异性抗体比，具有与抗原更高的亲合力
图3：c药结构示意图，pd1结合区域序列来自于康方自研的ak105（penpulimab），ctla结合区域序列来自于ak107（quavonlimab）
为了验证亲合力提高，作者使用octet® 设计了一个实验：
将高浓度的pd1和ctla4进行1：1混合，固化信号比较高（图2a）;或者用低浓度固化，使得固化信号比较低（图2b），然后分别与四价的c药和两价的ak105（penpulimab）结合，发现高密度的c药的亲和力比低密度的高一个数量级，而ak105则没有明显的变化。
图4：octet® 实验证明c药可以提高亲合力
03
c药使用的是igg1主干而o药，k药等pd1药物均为igg4主干，相比igg4，igg1在体内更稳定，而且有更好的cmc profile(更容易生产)。同时去除了与fc受体结合的位点，没有adcc（抗体依赖毒性），cdc（补体依赖毒性）带来的副作用。
图5：octet® 结果显示，c药剔除了fc受体以及c1q的结合活性，fc受体固化在his1k传感器上与抗体进行结合解离；c1q实验则是固化抗体，与c1q进行结合解离
目前，除了已经获批用于宫颈癌治疗之外，该药还在新的适应症进行临床试验，其中胃癌和肝癌已经走到了iii期。
图6：c药的临床适应症布局（数据来自于康方）
该药物的药理实验中的fc受体亲和力、抗原抗体亲和力以及结合特异性实验中均用到了赛多利斯的octet® 非标记分子互作系统。陈老湿记得康方第一台octet® 于2012年安装，一直用octet® 测亲和力10余年，足以说明其数据的可靠性与稳定性。
octet® 依赖的生物层干涉技术也是美国药典中用于检测亲和力的方法之一。
octet® 在药物研发中的优势：
非标记direct binding是趋势，结果更准确
快速测定亲和力，更加定量化地表征分子互作
通量高，使用检测，测试速度快，可以缩短研发周期
应用多，包括亲和力测定，ec50，浓度测试，从早期的亲和力排序、表位分组到后期的细胞株开发，工艺开发的残留物测试等应用都可以涵盖
用户多，文章多，认可度广
万金油技术，可以用与检测dna，小分子，蛋白质等各种生物分子
操作简便，耗材及维护成本低
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-参考文献-
[1] cadonilimab, a tetravalent pd-1/ctla-4 bispecific antibody with trans-binding and enhanced target binding avidity. mabs 2023, vol. 15, no. 1, 2180794