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全能核酸酶(同 Benzonase)应用程序说明

超级核酸酶是一种通过基因表达获得的基因工程重组产物。与苯甲酸酶核酸酶相似,它是粘质沙雷氏菌分泌的一种广谱核酸酶,由两个亚基组成,每个亚基大小为26kda。它也被称为非限制性核酸内切酶,表现出比dna酶i强34倍的活性。它可以有效地切割单链和双链dna和rna,消化3-5个碱基长度的5’-单磷酸寡核苷酸(低于杂交极限)。其活性需要mg2+离子,合适ph范围为6至10,优选反应温度为37°c。该产品以野生型苯甲酸酶为基础,经过基因工程改良,在酵母中表达和纯化。它具有去甲侧细菌内毒素,并在各种条件下(6m尿素、0.1m盐酸胍、0.4%triton x100、0.1%sds、1mm edta、1mm pmsf、0.4%脱氧胆酸钠)保持高稳定性和消化活性。它被广泛用作各种科学研究领域以及疫苗、蛋白质和多糖制药行业的首-选酶制剂,用于去除样品或产品中的核酸残留物,提高样品纯度和产品生物效率。
艾美捷全能核酸酶(同benzonase):
cat #: c-bsm2907
size: 25 ku / 50 ku / 100 ku
storage: -20°c
全能核酸酶(同benzonase)组分:
酶活性定义
一个单位(u)的活性被定义为在2.625ml反应体系中,在37°c和ph 8.0的条件下,在30分钟的反应中引起a260吸收峰改变1.0所需的酶的量(相当于将37μg鲱鱼精子dna完-全消化成寡核苷酸)。
全能核酸酶(同benzonase)应用程序:
1.降解各种形式的dna和rna,使其成为在制备疫苗、抗体、细胞疗法和其他生物产品时去除核酸(dna和rna)污染的最-佳工具,以满足美国食品药品监督管理局的标准,即用于治疗的生物制药中核酸残留量不超过10 pg/剂。
2.通过降解核酸降低细胞裂解物的粘度,促进溶液过滤/超滤过程,缩短处理时间,提高病毒、aav载体和来源于细胞的包涵体纯化过程中沉淀物和上清液的分离效率,提高色谱纯化效率,zui终提高产量和产品纯度。
3.在生物分析中的应用:可用于制备elisa样品、色谱法、二维电泳(蛋白质图谱)和蛋白质印迹分析,以提高分辨率和样品回收率。
质量控制
蛋白质纯度检测:
产品经sds-page检测,纯度≥95%。蛋白酶残留检测:
将产品与蛋白质底物在37°c下孵育16小时,并使用sds-page凝胶电泳检测底物。蛋白质底物应该没有显著变化。
内毒素残留检测:
内毒素残留量<10 eu/ml
备注:
1.在处理rna样品时,将其加入不含rnase的试管中。
2.超级核酸酶的有效工作温度范围为0~42°c,最适工作温度为37℃。酶活性在低温下可能会降低,但这可以通过添加2至5倍量的苯甲酸酶核酸酶或延长消化时间(2至3小时)来补偿。
3.含有大量蛋白质、细胞壁或其他盐的粗产物可能部分抑制酶活性。在这种情况下,有必要增加酶的剂量。
4.酶活性≥250u/ul。对于小体积制剂,在将酶加入系统之前,可以将其在稀释缓冲液(20mm tris-cl ph 8.0,2mm mgcl2,2mm nacl)中稀释至一定浓度。稀释后的溶液只能在4c下储存几天。
5.产物以液体形式提供,并且可以直接加入裂解缓冲液中以供共同使用。
6.为了您的安全和健康,请在实验过程中穿戴实验服、一次性手套和口罩。
该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。
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