脱钙是制作骨组织切片的重要环节，尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。为达到骨组织既充分脱钙，又保护骨组织中的抗原不被破坏，需要对含钙的组织固定之后再进行脱钙，然后再行常规制片chemicalbook。dta脱钙液与羟基磷灰石结晶的外层钙结合，形成可溶性的非离子化合物，同时又促进晶体内层的结合钙向外转移。借助这种连续性的作用使羟基磷灰石晶体逐渐融解，且ph中性时可起螯合作用。edta脱钙液的操作步骤：
1、骨组织脱钙时，取材不易过厚，一般大约 5mm。
2、组织固定后，用 pbs 清洗 3 次，每次 20min。
3、组织用蒸馏水洗清洗 3 次，每次 20min。
4、组织转移 20～30 倍体积的 edta脱钙液中，脱钙 10～30 天或更长时间。如果想加快脱钙速度，可以置于 37℃进行脱钙。如果必要，更换新的 edta 脱钙液继续脱钙，多数组织脱钙 2 周～3 个月即可，每周更换一次，直终点。亦可采用微波快速脱钙法：微波炉设在 200w 左右的档位，每次加热 5min，依据组织厚度和密度重复 3～5min，中间间隔 3～5min。
5、用蒸馏水冲洗数次。
6、常规脱水、包埋。