一、培养细胞（culture cell）样品处理方法：
培养动物组织细胞由于没有细胞壁，因此可以将细胞收集下来，直接加入裂解缓冲液（lysis buffer）抽提总蛋白。裂解缓冲液有多种配方，本实验室主要采用如下成份：
1. 7m urea，2m thiourea，4％（w/v）chaps，40mm tris-base，40mm dtt，2％ pharmalyte ph 3-10.
其他常用的裂解缓冲液如下：
2. 9.5m urea, 2%(w/v) chaps, 0.8%(w/v) phamarlyte ph3-10,1%(w/v) dtt and 5mm pefabloc proteinase inhibitor;
3. 加入 0.3-1% sds 在 95 c 煮样品 5mins，冷却后加入至少 5倍体积的（a）或（b）裂解液。
总蛋白抽提程序：
1. 培养细胞的收集；
2. 用磷酸缓冲液（pbs）洗细胞 3 次（室温，1000g，各 2min）；
3. 将细胞分装到 1.5ml eppendof管中，吸干残留的 pbs；
5. 4 c，40,000g，离心 1h；
6. 吸取上清并用 brandford 法定量蛋白，然后分装至 eppendof 管里保存在-78℃备用。
二、组织样品处理方法：
对大多数从动物或植物组织里提取总蛋白质而言，同样没有一种通用的程序。但遵循的原则基本相同。下面列出一种对植物树叶总蛋白的方法。
三氯醋酸－丙酮沉淀法（tca/acetone precipitation）提取植物树叶总蛋白程序：
1.在液氮中研碎叶片；
2. 悬浮于含 10％三氯醋酸（tca）和 0.07%β-巯基乙醇(可用 dtt替代)的丙酮溶液在－20℃ 的冰浴；
3.让蛋白质沉淀过夜然后离心（4 c，40,000g, 1h），弃上清；
4. 重悬沉淀浮于含 0.07%β-巯基乙醇的冰预冷丙酮溶液里；
5. 离心（4 c，40,000g, 1h）后真空干燥沉淀；
6.用（a）或（b）裂解液溶解沉淀，离心（4 c，40,000g, 1h）。
7. brandford 法定量蛋白，然后分装至 eppendof 管里保存在-78℃备用。
超速离心法：
1. 取材；
2. 用研钵在液氮冷冻条件下将样品研成粉末，每1g样品加入0.5ml裂解液，使用组织匀浆器匀浆30 s；
3. 组织悬液15℃，10 000×g离心10 min；
4. 上清液4℃，150 000×g超速离心45 min；
5. 小心避开上层漂浮的脂质层，吸取离心上清6℃ 40,000g再次离心50 min；
6. 取离心上清。bradford法定量，分装后置-75℃保存。