人类历*的次培养动物细胞时所用的添加物是动物血清(如新生牛血清、优级胎牛血清等,添加量一般在5%~15%之间)等天然的动物体液性补充物。这些天然的体液性补充物可以在较长的一段时间里维持细胞生长。它们主要是可以向培养细胞提供激素、生长因子、贴壁因子、结合蛋白和其它营养物质等。然而,尽管血清对细胞具有良好的生长促进作用,但使用血清作为培养基的添加剂依然存在很多问题。
高成本和可用性问题
血清作为培养基中的重要营养物质来源,血清可占总体成本的85%~90%。比如在新西兰等发达,其血清成本花费高达500~1000美元/l不等。另外,含血清培养基的可用性也各有不同,特别是对于那些关注动物福利的,当地居民对动物获得血清的行为极其抵制。
伦理问题
从牛胎儿中获得血清引起了社会对动物福利的关注,如对实验动物造成伤害,存在着道德和伦理上的问题。
血清批间差异问题
季节的交替、地域的跨越、动物个体或群体的差异,这些不同均会造成血清的批次间差异。另外,血清的组成存在可变性和不一致性,这也会导致培养基对细胞具有不一致的促生长能力。此外,每批培养基的质量会随着供体奶牛的饮食和身体状况的变化而变化。这种变化也会导致培养基的促生长特性发生显著差异,导致细胞培养过程的生长能力和速度的巨大差别。
成分问题
动物血清成分复杂,其包含有促进细胞生长的重要营养物质和活性成分。还含有少量的细胞毒性物质和抑制成分,这些成分会影响细胞的生长与表达。此外,在生物反应器中生长的细胞通常是将目标产物(一般是蛋白质)分泌到培养基质中。
高污染风险问题
污染通常来自存在于动物血清中的病毒和支原体以及与牛海绵状脑病相关的朊病毒。有研究表明35%~50%的商业含血清培养基是病毒阳性。另有研究表明,来源于肉制品的新型creutzfeldt-jakob病(人类版本的牛海绵状脑病)的发生很大原因要归咎于培养基中添加了牛血清。虽然被污染的生物制剂可能不会走向市场,但也没有人想要在制造的生物制药中冒这种污染的风险去生产。
血清培养基带来的诸多隐患,逐渐被人们认识。近年来,无血清细胞培养基逐渐盛行,
缔一生物为您介绍一款可无血清培养的细胞培养基,基础培养基m199的改良款,由himedia公司生产的sfre199系列,该系列有两款产品sfre199-1和sfre199-2。sfre199系列起初是用于培养狒狒肾bak细胞的。
有报道,在sfre199-1生长的原代bak细胞的群体二倍分裂时间(pdt)约为34.2小时,与加有5%牛血清的hlh(含水解乳白蛋白的hbss)相同,加有3%胎牛血清的m199的pdt为36小时。如果在sfre199-1中去除胰岛素或硫酸锌,则细胞不能融合,pdt延长。若含有胰岛素和硫酸锌,则其支持生长的能力相当于标准对照血清培养基。
缔一生物作为himedia公司在中国的代理商,在细胞培养、微生物培养及检测领域,一如既往地为您带来的服务。