细胞培养缓冲液有哪些？
一、细胞培养使用的碳酸氢钠
碳酸氢钠（nahco3）是细胞培养中常用的缓冲液，用于在4–10%二氧化碳存在的情况下维持培养基的ph值。此外，碳酸氢钠提供一些营养价值，且很少对细胞有毒。
培养基中碳酸氢钠的最终浓度取决于培养基的配方和培养箱的二氧化碳浓度。根据所用碳酸氢钠的浓度，建议使用不同的co2浓度。如果培养基配方包括：
nahco3（g/l）<1.5，需要浓度为4%的co2
nahco3（g/l）1.5–2.2，需要浓度为5%的co2
nahco3（g/l）2.2–3.4，需要浓度为7%的co2
nahco3（g/l）>3.5，需要浓度为10%的co2
二、细胞培养中使用的hepes缓冲液
尽管碳酸氢盐因其营养价值而成为常用的细胞培养缓冲液，但与hepes缓冲液相比，碳酸氢盐的缓冲能力在生理ph值时有所下降。hepes对细胞没有营养价值，但可以添加到ph 7.2至7.6的缓冲细胞培养基中。因此，当需要在co2培养箱外长时间处理细胞培养物时，添加hepes可提供额外的缓冲能力。
gibco hepes是一种两性离子性的有机化学缓冲剂，被归类为 good 缓冲液，源于norman good博士和他的同事在1966年发现的一组缓冲液（good等人，biochemistry 1966）。
good缓冲液（如hepes）具有以下特征：
lpka值在6.0至8.0之间
l高溶解度
l膜不通透性
l对生化反应的影响有限
l较低的可见光和紫外光吸收率
l化学和酶促稳定性
l易于制备
细胞培养基中hepes的水平可以从10 mm到25 mm不等。在gibco dmem中，hepes的浓度为25 mm。然而，在gibcomem/f12中，其浓度为15 mm。常用的浓度为25 mm。
三、其他细胞培养添加剂
1. hoch2ch2sh
hoch2ch2sh它能够清除羟基自由基（等），可作为生物抗氧化剂。羟基可溶于水并可降低挥发性。
2.氨基酸溶液
要增加培养细胞的活性并刺激生长，可向培养基中添加氨基酸添加剂。此外，添加氨基酸添加剂可提供营养并减轻体外细胞的生物合成负担。在蒸馏水中制备，该溶液中的非必需氨基酸浓度是mem-α 培养基中浓度的100倍。
3.hat添加剂
稀释后的hat适合用作融合后选择培养基，以去除未融合或自融合的hgprt-骨髓瘤细胞。 叶酸拮抗剂、氨基喋呤抑制 从头 核苷生物合成途径。
4.mem维生素溶液
向培养基中添加mem维生素溶液可增强培养中的细胞生长和活力，并减少体外细胞的生物合成负担。在0.85%的盐水中制备而成，该溶液中的维生素浓度是标准mem培养基中浓度的100倍。
5.丙酮酸钠
丙酮酸钠通常作为额外的碳来源补充到细胞培养基中。用于细胞培养的gibco丙酮酸钠以100 mm（100倍）溶液的形式提供，最终浓度为11,004 mg/l。
6.植物凝集素
植物凝集素是由红腰豆菜豆粗提取物制成的溶液。当以一定浓度应用时，这种添加剂可以在体外诱导各种哺乳动物单核细胞中的芽基发育。
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