近年来，随着薄层板固定相涂层多样化的发展，高效薄层色谱技术被广泛应用于诸多领域，尤其是 tlc-ms 的联用和商业化设备的日趋成熟，为生物分析研究提供了新的思路。
研究目的
本研究将肌红蛋白、细胞色素 c、β-酪蛋白和牛血清蛋白 (bsa) 等蛋白质的胰蛋白酶分解物中的肽通过高效薄层色谱法进行分离，然后通过与 esi-ms 偶联在薄层板上原位分析，确定序列覆盖率并与液相检测结果进行比较。
研究方法及分析结果
使用一维 hptlc 最多分离得到 20 个条带，获得非常紧凑的薄层色谱区，这大约是通过胰蛋白酶消化蛋白质样品获得的肽的数量 (例如细胞色素 c 由 104 个氨基酸组成，经过胰蛋白酶消化后形成 17 个肽）。
hptlc一维分离色谱图：
图1.荧光胺显色-366nm；
图2.茚三酮显色-白光
[样品从左至右分别为：肌红蛋白、
细胞色素c、β-酪蛋白和牛血清蛋白(bsa)]
再进一步薄层展开，通过 hptlc 二维分离，可以增加被分离物质的数量。由下图可知一维分离色谱可见 11 个分离条带，二维分离色谱可见 17 个分离斑点。
图 3. hptlc 二维分离色谱图: 细胞色素 c
表 1. hptlc / desi-ms 分析后获得的细胞色素 c 的序列覆盖率
序列覆盖率因固定相涂层材料和分离质量而异。应用纤维素板的二维分离，序列覆盖率几乎与 hplc / esi-ms 检测的序列覆盖率相当。
由此可见，hptlc-ms 非常适合分析简单和中等复杂的肽混合物。hptlc / ms 联用的一个特点是分离和检测可以各自独立进行，因此基于薄层开放性色谱的特点可以灵活优化分离和衍生化条件，使分离结果得到更多可能。同时薄层板均为一次性使用，可为各种条件优化设计带来极大的便利。
参考资料
[1] s. p. pasilis et al. anal. bioanal. chem. 391 (2008) 317
[2] s. p. pasilis et al. j. mass spectrom. 43 (2008) 1627
从以上例子可见，高效薄层色谱法，凭着高效、快速、操作简单、结果准确、灵敏度高和重现性好的优势，不单为样品检测带来创新标准，加上近年来发展迅速，配合自动化与数字化技术，更能发挥爆发力，深受业界欢迎。
camag hptlc pro 全自动高效薄层检测系统