支气管哮喘（以下简称哮喘）是由炎性细胞（嗜酸 性粒细胞、中性粒细胞）、气道结构细胞、气道平滑 肌细胞和细胞组分共同参与的慢性气道炎症性疾病。gina 2016 版定义哮喘为一种以慢性气道炎症和 气道高反应性为特征的异质性疾病。目前，作为哮 喘控制治疗的线药物，吸入糖皮质激素（ics）虽然可以显著改善儿童哮喘的症状，但并不能改变疾 病的自然进程，且不能预防哮喘的复发 ，如何减轻 气道炎症、改善气道重塑，从而防治哮喘，是临床 上亟需解决的问题。
1 材料与方法
1.1 实验动物及分组
3 周龄 sd 雄性大鼠，清洁 级，体质量（95±5）g，由广州中医药大学动物实验中 心提供，许可证号：scxk（粤）2013-0034。采用简 单随机分配法，分成 4 组：空白对照组、模型对照 组、*散组及*组，每组 10 只。本实 验对动物的处理符合动物伦理学要求。
1.2 药物及试剂
*散按 《太平惠民合剂局 方》所记载的原方比例：莲子肉 10 g、薏苡仁 10 g、 砂仁 10 g、桔梗 10 g、白扁豆 15 g、茯苓 15 g、人 参 10 g、甘草 10 g、白术 15 g、山药 15 g。复方各 成分药由广州中医药大学附属医院提供，用单 蒸水洗涤后，在三角瓶中加 4 倍体积的三蒸水浸泡 2 h，煎 2 次，每次煎 30 min，去渣，两煎液混合， g4 滤器过滤，于 60 ℃水浴中浓缩成每毫升含原药材 1 g，密封隔水煮沸备用。 *混悬液：天平称取 10 mg *干 粉，加入无水乙醇少许，并充分溶解，最后加入生 理盐水至 50 ml，避光保存于 3~4 ℃冰箱。* 干 粉 购 自 广 州 赛 国 生 物 有 限 公 司 ， 国 药 准 字 ： h。 1%卵白蛋白（ovalbumin，ova）生理盐水溶液：天 平称取适量的 ova 干粉，用生理盐水溶液充分溶解，使 1 ml 液体中含 ova 10 mg，每次用前临时配 制。ova 购自北京绿生源科技有限公司，批号： a5253。0.1％ova+al（0h）3 混合液：天平称取适量 的 ova 干粉，用少许生理盐水溶解均匀，然后用滤 菌器（0.22 μm）滤入到将 naoh、alcl3 按 3∶l 的摩尔 比混合的 al（oh）3 溶液中，并加生理盐水进行稀 释，使每 1.5 ml 的混合液中包含 1 mg ova 和 100 mg al（oh）3凝胶，每次用前临时配制。 酶联免疫吸附试验（elisa）试剂盒：包括大鼠白 细胞介素-10（il-10）、大鼠白细胞介素-17（il-17）、 大鼠转化生长因子-β1（tgf-β1）试剂盒，购自美国 r&d systems 公司，批号为 ek-m20157。
1.3 仪器
bsa223s-cw 万分之一电子天平，上海菁海仪器有限公司；lx 300 型低速迷你离心机，海门市其林贝尔仪器制造有限公司； jw-3021hr 高速台 式冷冻离心机，安徽嘉文仪器装备有限公司；st360 酶标仪，上海科华仪器有限公司；neg-50 恒温 冰冻切片机，thermo scientific 公司；55i 生物显微 镜，日本 nikon 公司；image-pro plus7 彩色图像分 析系统，美国 media cybernetics 公司。
1.4 造模和给药
通过致敏和雾化激发，成功复制大 鼠哮喘模型，造模方法 如下：
1、致敏：哮喘各组 大鼠分别在第 1 天和第 8 天腹腔注射 0.1％ova（100 mg）+al（oh）3（100 mg）混合液 1 ml 致敏，空白对照 组以生理盐水代替致敏液；
2、雾化激发：哮喘各组 大鼠第 15 天起以 1% ova 雾化激发，空白对照组以 生理盐水代替致敏液，隔天 1 次，每次 30 min，连 续 4 周。大鼠复制成功模型可出现呼吸急促，口唇 发绀，腹肌抽搐，站立不稳的现象。雾化第 1 天开始 同时给药，*散组以每次 15 g·kg-1 、25 ml·kg-1 的给药量经口灌服；*组以每次 5 g·kg- 1 、 25 ml·kg-1 的药量经口灌服；模型组及空白对照组均 灌服生理盐水 25 ml·kg- 1 。以上各组给药均为 1 次·d-1 ，连续 4 周，疗程结束 24 h 后处死大鼠取材， 其中模型组有 2 只在疗程结束前已死亡。
1.5 观察各组大鼠的一般情况
包括毛发、呼吸、活 动量、食量、体质量、不良反应等。
1.6 支气管肺泡灌洗液
（bronchial alveolar lavage fluid，balf）细胞计数 balf 制备：处死大鼠，取 仰卧位，打开胸腔，用留置针行，结扎右 侧主支气管，0.3 ml 生理盐水灌洗 3 次，balf 4 ℃、4 000 r·min-1 离心 10 min，取上清液，-20 ℃ 保存备用；balf 中细胞沉淀用 pbs 重悬，并涂片作 瑞氏姬姆萨染色，于 400 倍镜下随机选取 3 个视野，分别进行白细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒 细胞计数，计算每高倍镜视野下各类细胞数目平均 值并记录。
2 结果
2.1 各组一般情况及体质量变化
见表 1。各组大鼠 在给药前体质量无明显差异，给药后*散 组、*组大鼠生理状态、哮喘症状均好转， 体质量与模型对照组相比明显升高，差异有统计学 意义（p＜0.05）。
2.2 *散对幼龄哮喘大鼠balf炎症细胞计数的影响
见表 2。模型组 balf 中，炎症细胞计数较 空白对照组显著增多，*散组和*组 较模型对照组显著降低，差异均具有统计学意义 （p＜0.05）。
3 讨论
哮喘是一种涉及多种炎症细胞相互作用、许多介 质和细胞因子参与的一种慢性气道炎症疾病。气道 慢性炎症被认为是哮喘的基本病理改变和反复发作的主要病理生理基础。过往证据表明 th1/th2 细胞 比例和功能失衡是哮喘主要的免疫学异常，然而， 更多的研究提示，单纯的 th1/th2 平衡理论并不能进 行完整解释 。近年来，th17 分泌的促炎作用的前炎 症细胞因子 il-17，以及 cd4+ cd25+ treg 分泌的抑炎 作用的 il-10、tgf-β，是哮喘机制的研究热点之 一 。
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