(一)细胞系相差观察和摄影
1.相差装置的使用 相差装置或显微镜都是由两部分组成,相差聚光器和相差接物镜。在每个相差接物镜的光学系统中都有一个光环透镜;在聚光器内有数个可转换的相位板,一定倍数的接物镜使用时需与相应的相位板一致。相差观察时对照明要求严格,光轴要对正,视野照明光度需均匀。
2.操作步骤
(1)调好相位板,使聚光器相位板号与接物镜放大倍数(相位板)相一致。
(2)抽取接目镜,再更换辅助望远镜,移动辅助镜筒并调整聚光器相位板,使视野中两个大小一样的光环必须相互吻合。
(3)细胞系再重新换上原接目镜,即成相差图像;当更换不同倍数接物镜时,需按上述过程重新调节。
3.注意事项
(1)对培养瓶、皿要求:相差显微镜观察要求底物平坦、质地均匀、透光度强;一般玻璃器皿凹凸不平,不适合做相差观察和摄影,用质地均匀的塑料器皿培养较好。
(2)准备:观察和摄影前,要擦净培养瓶表面,切勿残留污迹而影响透光度。
(3)调光:调整照明光的照明度及光轴,使视野照明均匀。对准光轴是显微摄影的重要条件,否则不易获得理想效果。
(4)细胞系在无自控摄像装置初次拍摄时,应将放大倍数、照明强度和曝光等条件逐一记录,再做一组不同曝光时间的试验,显影后选取组合,作为以后再拍摄时的标准。