在生物体内，蛋白的翻译后修饰过程是蛋白发挥各种不 同生化功能的基础，这些翻译后修饰包括糖基化、氧化、 甲基化和磷酸化等。作为生物药物的蛋白在生产、运输、 保存过程中会产生变体，从而影响到药物的活性和稳定 性。因此蛋白的肽谱经常被用来研究蛋白的翻译后修饰 过程以及蛋白变体的存在。同时也用于生物制药行业蛋 白产品初级结构的确认 [1-3] ，从而更好地控制生化药品的 质量和确保病人的用药安全。
本文采用*酶解蛋白的方法，得到各种蛋白的肽 谱，比较几款不同的反相色谱柱在分离蛋白酶解片断时 的差异，同时借助质谱，评价蛋白酶解产物 - 多肽在酸性 或者碱性流动相条件下表现出分离性能的差异。
仪器配置 thermo ultimate 3000 系统：泵：dgp-3600rs；自动进样器： wps-3000trs；柱温箱：tcc-3000rs；检测器：dad-3000rs 质谱：tsq vantage 色谱软件：chromeleon 6.8
测试条件 与紫外检测器兼容的液相色谱条件 色谱柱： 1- acclaim 120 c18, 3mm×150mm, 3µm (p/n063691, s/n001119)； 2-acclaim 120 c8, 2.1mm×100mm, 3µm (p/n059123, s/n001337)； 3-hypersil gold c4, 2.1mm×150mm, 1.9µm (s/ n1008512×7, lot10603)； 流动相： 95% 超纯水 +5% 乙腈 +0.1%tfa：5% 超纯水 +95% 乙腈 +0.08%tfa, 梯度洗脱：
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