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大鼠elisa试剂盒空白孔为什么显现为阳性

昨日,我司万经理收到来自一客户单老师的咨询,单老师咨询大鼠elisa试剂盒空白孔为什么显现为阳性?
老师的实验流程大致是:包被过夜4摄氏度12小时->一抗65分钟->二抗45分钟->显色15分钟“->”表示洗板,洗五次,每次3min。空白孔为不包被,加一抗和二抗,结果空白孔比阳性值还高。
我司技术详细分析后提出由以下几种可能:
1.手工洗板吗,临近空白孔的标准品浓度,有可能甩液体的时候没注意,标准孔的倒流到空白孔去了哦!
2.如果没有封闭,有可能是未经过封闭的板子对一抗有吸附作用,吸附一抗后二抗自然色。
3.如果你封闭了,说明你用的封闭液中的蛋白能被一抗结合。
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