人蛋白c(protein c)elisa试剂盒免费代测本生生物公司供应:elisa试剂盒,动物血清,荧光定量pcr耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,进口吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器。
本试剂盒仅供研究使用
检测范围: 96t
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中蛋白c(protein c)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中蛋白c(proteinc)水平。用纯化的蛋白c(protein c)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入蛋白c(protein c),再与hrp标记的蛋白c(protein c)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物tmb 显色。tmb 在hrp酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的胎盘核糖核酸抑止剂(hpri)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(od 值),通过标准曲线计算样品中蛋白c(protein c)浓度。
试剂盒组成:
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 ; 2 酶标试剂 6ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 ; 4 样品稀释液 6ml×1 瓶
5 显色剂a 液 6ml×1 瓶 ; 6 显色剂b 液 6ml×1/瓶
7 终止液 6ml×1 瓶; 8 标准品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶
9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶; 10 说明书 1 份
11 封板膜 2 张; 12 密封袋 1 个
标本要求
1. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2. 不能检测含 nan3 的样品,因 nan3 抑制胎盘核糖核酸抑止剂(hpri)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
60 ng/l5 号标准品150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
30 ng/l4 号标准品150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
15 ng/l3 号标准品150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
7.5 ng/l2 号标准品150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
3.75 ng/l1 号标准品150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,
然后再加待测样品 10µl(样品终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 a50µl,再加入显色剂 b50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(od 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
人蛋白c(protein c)elisa试剂盒免费代测
操作程序