人类诱导多能干细胞(hipscs)是一类可用于疾病建模、药物开发和组织工程领域的多能诱导干细胞。与crispr-cas9等功能强大的基因编辑技术结合后，可根据不同患者的特性进行疾病相关遗传变异的研究和识别。
然而，培养hipscs的步骤较为繁琐，细胞对异常的处理和操作非常敏感，任何操作的问题都有可能导致细胞和遗传毒性应激的积累，进而导致不良分化和多能性丧失。基因编辑建立单细胞衍生的hipsc克隆过程中常用的技术往往过于复杂或粗暴，导致单细胞克隆效率低下。此外，它们在确保衍生培养物单克隆性方面存在局限性。为此，英国iotasciences公司推出了可实现100%单细胞分离的isopick单细胞可视化分选系统，有效解决了培养hipscs单克隆过程中的困难。
如右上图所示，单细胞可视化分选系统isopick采用纳升级的网格式单细胞腔室技术（grid技术），可实现高通量、高自动化的单细胞可视化分选；确保分选所得的单细胞样品中只有一个单细胞，结果可验证、可追踪；分选过程非常温和，能够确保更高的单细胞存活率，达到更佳的克隆生长效果。单细胞可视化分选系统isopick可全自动进行单细胞的分选、拾取并转移1.5 µl至200 µl的液体至pcr管或96孔板中。
使用isopick从grids内分选hipsc单细胞置于laminin-521,vitronectin-n, synthemax和imatrix (laminin-511)4种不同基质且含有培养基的96孔板中。以第7-10天内的时间计算得出的单细胞克隆效率可以发现，无论使用的包被基质或hipsc细胞系，平均克隆效率均>70%（上图），明显高于其他通常使用的方法(包括facs)，表明isopick对敏感单细胞的温和处理，能够确保细胞的高存活率和更好的克隆生长效果。
isopick使用户能够以快速、高效、自动化的方式从多样、异质的细胞群体中分离单个细胞。grid腔室非常适合用于观察和记录单个细胞的分离过程。 用户可将单个细胞分离并直接置入96孔板用于细胞克隆。相比传统方法，这种方法用简单的线性工作流程，显著提高了细胞分离与克隆效率，操作流程高度自动化，可以将样品无缝衔接单细胞组学的后续操作。
单细胞可视化分选系统的优势：
● 全自动化流程
● 操作非常简单 对细胞无损伤
● 结果可追踪
● 分离效率高达100%
● 直接转移到pcr管或96孔板
● 结构紧凑，体积小巧
文献举例：
单细胞可视化分选系统相关文献发表于cell、advanced science、small methods、nature communications 等期刊，如下摘引了近年三篇具有代表性的文献和大家分享。
● soitu c, stovall‐kurtz n, deroy c, et al. jet‐printing microfluidic devices on demand[j]. advanced science, 2020, 7(23): 2001854.
● gangoso e, southgate b, bradley l, et al. glioblastomas acquire myeloid-affiliated transcriptional programs via epigenetic immunoediting to elicit immune evasion[j]. cell, 2021, 184(9): 2454-2470. e26.
● deroy c, nebuloni f, cook p r, et al. microfluidics on standard petri dishes for bioscientists[j]. small methods, 2021, 5(11): 2100724.
● deroy c, wheeler j h r, rumianek a n, et al. reconfigurable microfluidic circuits for isolating and retrieving cells of interest[j]. acs applied materials & interfaces, 2022, 14(22): 25209-25219.
● oliveira n m, wheeler j h r, deroy c, et al. suicidal chemotaxis in bacteria[j]. nature communications, 2022, 13(1): 7608.
样机体验：
为更好地服务中国科研工作者，quantum design 中国引进了单细胞可视化分选系统-isopick样机，将为大家提供为专业的售前、销售、售后技术支持，欢迎各位老师参观试用！
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