mrna原液中采用hepes作为buffer可能与前一步rna聚合酶体外转录密切相关。
早在1987年便有研究报道使用hepes缓冲对用于体外转录，在该研究中考察了不同反应条件下ihnv（感染性造血坏死病毒）的 rna 聚合酶的体外转录，研究结果表明对比tris，使用hepes缓冲液可以最大限度地提高体外转录（ivt）效率。
研究中对缓冲条件的研究表明，hepes缓冲液刺激的rna合成量比tris缓冲液高三倍（图1 a），最佳浓度的hepes缓冲液为400mm。
英国帝国理工大学医学院传染病系系主任robin shattock是mrna预防性疫苗领域的专家，与biontech以及pni等公司都有较为密切的合作。其团队2021年发表关于sarna体外转录体系优化的文章中，考察筛选了影响sarna体外转录的关键影响因素，最终确定了采用40mm浓度的hepes作为ivt反应体系buffer，具有更优的体外转录效果。
2016年biontech发表lpx-mrna制剂的文章中mrna原液中所采用的buffer为hepes。该研究中使用hepes缓冲液配置1mg/ml的rna原液，用于进一步制备rna-lpx。
hepes作为ivt反应体系buffer具有优势，这是我们结合相关文献，推断biontech采用hepes缓冲对作为mrna原液buffer的原因。
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