小儿神经母细胞瘤(nb)是目前威胁儿童生命的主要肿瘤之一,发病率约占全部恶性肿瘤患儿的7%,而病死率却占其15%,仅次于白血病。目前nb诊断方法有b超定位、香草扁桃酸(vma)层析法、骨髓细胞形态学、病理及单克隆抗体检测等。b超定位能发现肿瘤的部位、大小,但肿瘤小于2cm时不易发现。骨髓细胞形态学检查只能对有骨髓转移的nb患儿作出诊断,单克隆抗体是检测患儿血液、骨髓或病理活体组织的一种免疫方法,难以早期诊断nb。
利用hplc法测定随机尿中vma、hva的含量,以尿中肌酐(cr)量标化标本中的vma、hva浓度,表示vma、hva的含量,探讨其在nb早期诊断及筛查中的意义。
测定方法:取被测尿液离心(3000r/min,5min),其上清经孔径0.22µm滤膜加压过滤。滤液用0.01mol/l盐酸10倍稀释,并加入dhba至4.0µ mol/l。尿稀释液20µl注入液相色谱仪中,用流动相洗脱,电化学检测器检测。取尿样100µl,用比色法在上测定尿cr量。采用标准品保留时间及样品加标准品相结合的方法做为定性指标。每日试验时,分别取不同浓度的标准液(vma为2.50、1.25、0.625µmol/l,hva为5.00、2.50、1.25µmol/l,dhba为4.0µmol/l)20µl进行hplc分析。用内标法,以峰面积计算被检尿液中vma、hva浓度,再用尿cr含量予以标化尿中vma、hva浓度。
关键词:液相色谱仪