进口elisa试剂盒实验内标法的操作:
① 将已知量的内标样加入标准样品,制成混合标样,并配制一系列的已知浓度的工作标样。混合标样中标样与内标样的摩尔比不变。
② 注入色谱柱,以(标样峰面积/内标样峰面积)为响应值。
③ 根据响应值与工作标样浓度之间存在的线性关系,即w=f×a,制成标准曲线。
④ 将已知量的内标样加入未知样品,注入色谱柱,得到欲测组分的响应值。
⑤ 根据已知的系数f,即可求出欲测组分的浓度。
注意事项
1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或bsa等封闭。
2. 在elisa中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求ph在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的od值。选择od值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接elisa法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如opd等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如tmb和abts是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是h2o2在临用前加入。
进口elisa试剂盒牛γ干扰素(ifn-γ)elisa kit 英文名: bovine interferon γ ,ifn-γ elisa kit
牛γ氨基丁酸(gaba)elisa kit 英文名: bovine gamma-aminobutyric acid,gaba elisa kit
牛β-乳球蛋白(β-lg)(过敏原bosd5)(lgb)elisa kit 英文名: bovine beta-lactoglobulin(beta-lg)(allergen bosd5)(lgb)elisa kit
牛β羟基丁酸脱氢酶(β-hbdh)elisa kit 英文名: bovine β-hydroxybutyrate dehydrogenase,β-hbdh elisa kit
牛β羟丁酸(βohb)elisa kit 英文名: bovine beta-hydroxybutyric acid,β-ohb elisa kit
牛β内啡肽(β-ep)elisa kit 英文名: bovine beta-endorphin,β-ep elisa kit
牛β干扰素(ifn-β/ifnb)elisa kit 英文名: bovine interferon β,ifn-β/ifnb elisa kit
牛β-防御素(β-defensins)elisa kit 英文名: bovine β-defensins elisa kit
牛α乳清蛋白(α-la)elisa kit 英文名: bovine α lactalbumin,α-la elisa kit
牛α晶体b链(cryab)elisa kit 英文名: bovine alpha-crystallin b chain,cryab elisa kit
牛α干扰素(ifn-α)elisa kit 英文名: bovine interferon α,ifn-α elisa kit
牛α1酸性糖蛋白(α1-agp)elisa kit 英文名: bovine α1-acid glycoprotein,α1-agp elisa kit
牛p物质(sp)elisa kit 英文名: bovine substance p,sp elisa kit
牛n-乙酰-β-d-氨基葡萄糖苷酶(nag)elisa kit 英文名: bovine n-acetyl-β-d-glucosaminidase,nag elisa kit
牛n端前脑钠素(nt-probnp)elisa kit 英文名: bovine n-terminal pro-brain natriuretic peptide,nt-probnp elisa kit
牛d-乳酸elisa kit 英文名: bovine d-lactic acid elisa kit
牛c肽(c-peptide)elisa kit 英文名: bovine c-peptide elisa kit
牛c反应蛋白(crp)elisa kit 英文名: bovine c-reactive protein,crp elisa kit
牛5羟色铵/血清素/血清铵(5ht/st)elisa kit 英文名: bovine 5-hydroxytryptamine/serotonin,5ht/st elisa kit
牛ⅲ型前胶原氨基末端肽(pⅲnp)elisa kit 英文名: bovine n-terminal procollagen ⅲ propeptide,pⅲnp elisa kit
牛1-磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸磷酸二酯酶ζ1(plcz1)elisa kit 英文名: bovine 1-phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate phosphodiesterase zeta-1(plcz1)elisa kit
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