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大小鼠COPD熏烟造模方法的经验小结

近年来,由于空气环境,吸烟,用药等各种因素原因导致目前在我国慢性阻塞性肺疾病(copd,即慢阻肺)成为一种常见、多发、高致残率和高致死率慢性呼吸系统疾病,它的发生与肺部对有害气体或颗粒气溶胶的异常炎症反应有关。慢阻肺的特征是慢性气道炎症,黏液高分泌、气道重塑,和肺气肿,随着病情反复发作、急性加重,导致肺功能逐渐下降呼吸困难。在研究慢阻肺的形成,发展以及治疗和有效预防中,建立理想的实验动物模型是极其重要的基础和条件。
目前copd动物造模的方法中,熏烟实验即采用长时间香烟烟气对动物进行暴露的方法被证明为比较理想的方法。根据我们多年来接触的不同实验方法分类总结一下经验:
一.经典的实验方案:
实验动物
小鼠(或大鼠)
实验设备
动物copd熏烟造模系统(如德伯科技camp-afw系统)
熏烟周期
6个月
熏烟时间
每天两次,两次间间隔4个小时以上,每周至少5天
单次熏烟
每次1小时
用烟数量
符合iso/cir标准的烟气条件下每次不少于1根香烟/动物
烟气浓度
不小于350mg/m3(pm表征条件下)
注:符合iso/cir标准的烟气需要专业的香烟抽烟机器人或香烟发生器实现,市售线性烟气发生器发生的烟气浓度往往过大,需和iso/cir标准的烟气做校准后方有参考意义。
二.急性造模方案:
实验动物
小鼠(或大鼠)
实验设备
动物copd熏烟造模系统(如德伯科技camp-afw系统)
熏烟周期
<2月
熏烟时间
每天两次,两次间间隔4个小时以上,每周至少5天
单次熏烟
每次1小时
用烟数量
符合iso/cir标准的烟气条件下每次不少于1根香烟/动物
烟气浓度
不小于350mg/m3(pm表征条件下)
lps注射
在第15天,第45天分布注射一次lps,总次数不得超过两次
注:增加了lps注射会大大缩短熏烟造模周期,但会提高动物死亡率,特别是小鼠。
熏烟造模结果评价:
仅熏烟造模时对照组动物几乎无死亡且呼吸均匀,毛发光泽,食量及活动正常。增加lps注射时会造成动物有死亡情况。
造模组动物观察结果多为:陆续出现流鼻涕、打喷嚏、咳嗽、眼角有血样分泌物、呼吸有啰音、毛色枯黄无光泽等现象。甚至部分有脱毛现象,躁动,倦怠蜷缩,腹部胀大,出现点头运动,甚者张口呼吸等明显症状。病理结果为:显示柱状细胞增加,炎症细胞浸润。
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