蜂王浆是*的*可供人类直接服用的高活性成分的超级营养食品。
10-羟基-2-癸烯酸(10-hda)是蜂王浆中*的一种不饱和脂肪酸,由于这种酸在自然界的其它物质中没有,只存在于蜂王浆中,所以也称为王浆酸。分离出的纯王浆酸呈白色晶体,在新鲜的蜂王浆中多以游离形式存在,性质比较稳定,具有很好的杀菌、抑菌、抗疲劳、抗衰老作用和抗癌、抗放射的功能,为此许多保健食品均添加有蜂王浆。因此作为评价蜂王浆及其制品质量优劣的主要指标之一的10-hda含量测定显得尤其重要。至今为止,10-hda 含量测定有薄层扫描法、分光光度法、气相法、液相法,且多见于分析蜂王浆中的10-hda。薄层扫描法、分光光度法专属性和准确性较差,气相法处理繁琐,目前zui为通用的是hplc法。
液相法处理简单、结果准确,本公司基于以上情况,建立了超声提取、冷藏沉淀后,用对羧基做内标,反相液相色谱法测定蜂王浆及其制品中10-hda含量的方法,取得了令人满意的结果。
一、主要性能特点:
1)蜂王浆中葵烯酸检测分析液相色谱仪lc-600b整套系统由lc600b高压恒流泵:2台,spd600b紫外检测器:1台,scl600b系统控制器:1台,混合器:1只,7725i手动进样阀:1只,反控色谱工作站:1 套(反控主机),液相色谱柱:1支(c18 4.6*250mn,5um),微量进样器:1支(50ul/100ul),进样支架:1只(进样阀用)等组成;安装、调试及使用都非常简单。
2)lc-p600高压恒流泵是微处理器智能控制的往复式双柱塞并联泵,具有工作压力高、脉动小、稳定可靠、操作方便等特点。其机械组件由电脑辅助设计,各主要零部件均在*的数控加工中心制造,因此具有加工度高、泵体密封性能好、零件的互换性好等特点。
3)lc-uv600紫外检测器采用了平行的双锥孔流通池,样品池和参照池*处于对等的条件。锥孔设计的流通池,可以在同样的池体积情况下,提高通过池孔的光能量,明显降低了仪器的静态噪音和信号漂移。
二、科捷液相色谱仪lc-600b解决蜂王浆中葵烯酸含量仪器主要配置和检测分析条件
lc600b高压恒流
输液方式
微体积串联双柱塞
zui大输液压力
0~9999psi
流量设定范围
0.001~9.999ml/min(以0.001
ml/min步长调节流量)
流量设定值误差
≤0.5%
流量稳定性误差
≤0.2%rsd
梯度误差
±1% (0~99%水/
丙酮水溶液2液梯度)
压力脉动
小于15psi (流量1ml/min,
压力600~1600psi)
泵密封性
压力为5400psi,时间为10min,
压降小于400psi
时间程序功能
有
尺寸
w260×h130×d420mm
重量
11kg
使用环境温度范围
4~40℃
spd600b紫外可见可变波长检测器
波长范围
190nm~700nm
波长示值误差
≤±1nm
波长重复性误差
≤±0.1nm
动态噪声
≤ ±0.75×10-u
(甲醇,1ml/min,254nm,20℃)
静态噪音
≤ ±0.5×10-5a
空池,响应时间1秒,20℃)
动态基线漂移
≤±1×10-4au/h
(甲醇,1ml/min,,254nm,20℃)
静态基线漂移
≤0.5×10-4
(空池,响应时间1秒,20℃)
线性范围
≥104
zui小检测浓度
≤1×10-9 g/ml
(萘/甲醇溶液)
定性重复性
rsd6≤ 0.1%
定量重复性
rsd6≤ 0.5%
光谱带宽
6nm
流通池体积
8μl
光程
10mm
时间程序功能
有
尺寸
w260×h130×d420mm
重量
11kg
使用环境温度范围
4~40℃
(1)主要仪器配置
1、lc-3000液相色谱仪;
2、色谱柱:c18,250*4.6*10 或250*4.6*5;
3、高速离心机(大于4500r/min;50ml);
4、超声波震荡仪;
5、涡旋混合器;
6、分析天平(万分之一);
7、溶剂过滤器(带0.45um有机、水系过滤膜和真空泵);
(2)主要试剂
1、纯净水(二次蒸馏水)
2、甲醇:分析醇
3、乙醇:优级纯
4、内标物:对羟基苯甲酸甲酯含量99.0%
5、10-had标准品:99.0%以上。
使用前应在放有浓硫酸的减压干燥器内减压干燥24h 6.10-had标准溶液:取干燥后的10-had标准品约25mg,精密称定,加无水乙醇溶解并移入1000ml容量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀。此溶液每毫升含内标物约0.65mg。7.盐酸(c=0.03mol/l):量取0.1mol/l盐酸100ml,加入200ml重蒸馏水中。
(3)色谱条件
色谱柱为kromasil c18 柱,流动相为v(甲醇):v(水):v(磷酸)=55:45:0.2,流速1.0ml/min,对羧基作内标,检测波长210nm。本法简单、快速、准确,重现性好,回收率高(97.6%~101.8%)。
(4)样品处理
样品解冻至室温后用玻璃棒搅匀,取约0.5g,置于已称定的50ml容量瓶中,精密称定,加0.03mol/l盐酸1ml和水2ml,置漩涡混合器上混合使样品溶解,加无水乙醇30ml,边加边轻轻摇动,再精密加入内标溶液10ml,并用无水乙醇稀释至刻度,摇匀,立即置超声波中超声15min,或置漩涡混合器上振荡15min,取出,在3000r/min下离心10min后测定。如不能及时测定,应放置在冰箱中冷藏待测。
关键词:液相色谱仪 紫外检测器 控制器 色谱柱 加工中心