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气相色谱-质谱联用(GC—MS)技术的运用

气相色谱仪作为一项成熟的分析技术仪器可连接多种检测器,在代谢组学中以火焰离子化检测器(fid)和质谱检测器zui为常见。
质谱检测器可以通过标准谱图库提供化合物结构信息,并具有高灵敏度等优势,因而非常适合于代谢组学的研究。对极性强、挥发性低、热稳定性差的物质需要衍生化后再进行gc—ms分析旧。衍生化不仅可以改善分析对象的挥发性、峰形、分离度,也可提高检测的灵敏度。
winder等叫用气相色谱-飞行时间质谱(gc—tofms)技术对大肠杆菌提取物进行了全组分分析,建立了细胞淬灭和胞内物质提取的评价方法,证明统计分析方法和实验结合才能实现胞内物质的定量。ding等旧1j利用gc.tofms测定工业酒精连续发酵和一次性发酵过程中酵母细胞内代谢物质的差异,分别检测到143和128种化合物。在转基因水稻研究中,引用gc.fid分析野生型和转基因型水稻代谢表型的差异,用gc-ms鉴定了在转基因和环境影响下水稻中含量均有显著性差异的代谢物,对转基因水稻的安全性进行了初步的研究。
在对复杂样品进行分析时,由于峰容量的限制,一维色谱很难达到理想的分离效果,多维色谱是改进分辨率的办法之一。全二维气相色谱(gc×gc)把分离机理不同而又相互独立的两根色谱柱以串联方式连接在一起,这两根色谱柱之间装有一个调制器(调制器起捕集再传送的作用),经*柱分离的组分由调制器聚焦后以脉冲方式进入第二柱进行进一步的分离,所有组分从第二根色谱柱进入检测器。gc×gc有别于中心切割的二维气相色谱(gc+gc)。gc+gc是把*根色谱柱流出的部分馏分转移到第二根色谱柱上进行进一步分离,峰容量是两根柱的峰容量之和;而gc×gc是两根柱的峰容量之积,因而大大提高了分离系统的分辨率。由于gcxgc在第二维上的分离非常快,一般使用fid做检测器,与质谱联用时仅tofms能够实现快速扫描。
gc×gc越来越多地应用于石油化工、环境保护、药物开发、植物研究等复杂样品的分离分析。通过实验证明,在代谢组学研究中应用gc×gc—ms可以减少基质干扰、增大峰容量,与采用一维gc—ms相比,gcxgc-ms更适合于生物样品的定量分析。可以预期,gc×gc技术将会在复杂混合物的分离分析尤其是代谢组学的研究中发挥更大的作用。
关键词:气相色谱仪 色谱柱
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