电位滴定法测定酱油中氨基酸态氮的含量
一、原理
根据氨基酸的两性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性,将酸度计的玻璃电极及甘汞电极(或复合电极)插入被测液中构成电池,用碱液滴定,根据酸度计指示的ph值判断和控制滴定终点。
二、仪器与试剂
1、仪器
酸度计磁力搅拌器烧杯(250ml)微量滴定管
2、试剂
ph=6.18标准缓冲溶液
20%中性*
0.05mol/l左右的naoh标准溶液
三、测定操作
1、样品处理
先根据实验四测出待测酱油的比重,然后吸取酱油5.00ml于100ml容量瓶中,加水定容。吸取定容液20.00ml于250ml烧杯中,加水60ml,放入磁力转子,开动磁力搅拌器使转速适当。用ph6.18的标准缓冲液校正好酸度计,然后将电极清洗干净,再插入到上述酱油液中,用naoh标准溶液滴定至酸度计指示ph8.2,记下消耗的naoh溶液体积。
2、氨基酸的滴定
在上述滴定至ph8.2的溶液中加入10.00ml的中性*,再用naoh标准溶液滴定至ph9.2,记下消耗的naoh溶液体积。
3、空白滴定
吸取80ml蒸馏水于250ml的烧杯中,用naoh标准溶液滴定至ph8.2,然后加入10.00ml中性*,再用naoh标准溶液滴定至ph9.2,记下加入甲醛后消耗的naoh溶液体积。
四、结果计算
氨基酸态氮%=
v1--- 酱油稀释液在加入甲醛后滴定至ph9.2所用naoh标准溶液的体积ml
v2--- 空白滴定在加入甲醛后滴定至ph9.2所用naoh标准溶液的体积ml
c---naoh标准溶液的浓度mol/l
m---吸取的酱油的质量g
0.014 ---氮的毫摩尔质量g/mmol