紫外可见光分光光度计工作原理与红外光谱、拉曼光谱的工作原理近似，采用一定频率的紫外可见光照射所需检测的物质，引起物质中电子跃迁，从而表现出随着吸收波长变化而引起的光谱变化，记录光谱变化形成分析数据。紫外可见分光光度计的基本结构
仪器主要结构包括：辐射源(光源)、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理器、自动记录器、显示器等部件。由光源发出连续辐射光，经单色器形成单色光。单射光照射吸收池，再经光经检测器光电管将光强度转变成电信号，再经显示系统，完成测定。
使用注意事项：
1)、紫外可见分光光度计在开机前将样品室内的干燥剂取出，仪器自检过程中禁止打开样品室盖。
2)、吸收池必须洁净，并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。比色皿内溶液以皿高的2/3～4/5为宜，不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。测定时应保持比色皿清洁，池壁上液滴应用擦镜纸擦干，切勿用手捏透光面。测定紫外波长时，需选用石英比色皿。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净，晾干防尘保存。
3)、测试品标注测试物质以及配置浓度，且吸收度在0.3～0.7之间为宜。测试中，因采用测试品溶剂为空白对照：1cm石英吸收池，由仪器规定波长或者规定的吸收峰±2nm以内自动扫描测定，测吸收度以核对测试品吸收峰位置是否正确。
4)、选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度值会偏低，狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准，对于大部分被测品种，可以使用2nm缝宽。
5)、实验结束后将比色皿中的溶液倒尽，然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净，倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内，盖上防尘罩，做好使用登记。