动物免0疫
使用 quickantibody 作为免0疫佐剂,对小鼠腿部肌肉注射免0疫,mrj 重组蛋白( 1 μg /ml) 与免0疫佐剂各200 μl 混匀免0疫 6-8 周龄 balb / c 小鼠 4 只,每只注射 100 μl。初次免0疫后第 21 天同样的方法进行第二次免0疫,第 35 天尾静脉取少量血做效价检测,间接 elisa 检测效价滴度高于 1 ∶ 8 000 则进行冲击免0疫,冲击免0疫直接以不加佐剂的 mrj 蛋白对小鼠冲击免0疫一次,每只 20 μg。冲击免0疫后 96 h 内取脾0脏细胞做细胞融合。
1. 第21天按同样方式加强免0疫1针。备注:每次佐剂和*原现配现用。
2. 第35天采微量血进行elisa测定,*0体滴度应在1:10000-1:10000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行*原冲击免0疫和脾细胞融合。
3. 若*0体滴度没有达到要求,可在第42天按同样方式加强免0疫1针。备注:通常情况下小鼠只需免0疫2针,新型佐剂,而家兔往往需要免0疫3针。
4. 若免0疫3针,可在第52-56天采微量血进行elisa测定,*0体滴度应在1:10000-1:1000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行*原冲击免0疫和脾细胞融合。备注:佐剂免0疫效果有时也与*原特性有关,若免0疫3针后仍达不到要求,不建议进行更多针次免0疫。
原理
新型乳剂是一种具有自主知识产权、独0特配方的新型油包水佐剂,用于免0疫小鼠和家兔等实验动物以制备单、多克0隆*0体。该佐剂以弗氏不完全佐剂为基础,添加了多种具有强免0疫刺激0活性的tlr配体。新型佐剂与常规使用的弗氏佐剂相比,具有以下优点:
(1)新型乳剂活性强于弗氏不完全佐剂;
(2)与弗氏完全佐剂不同,不含有干扰免0疫应答的无关蛋白成分;
(3)安全性好,副反应率低;
(4)免0疫针次少、*原用量低等多方面优点。
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