英文名称:calcein red™ am
产品参数:
ex (nm)562em (nm)576
分子量1015.79溶剂dmso
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品规格 1mg
产品货号 21900
产品概述:
钙黄绿素红,am是美国aat bioquest生产的用于检测活细胞的荧光探针,calcein am是用于标记和检测活细胞细胞功能的流行的荧光探针之一。
然而,calcein am的单色使得在多色应用中不可能使用这种有价值的试剂。
例如,由于与gfp相同的颜色,不可能将calcein am与gfp-转化细胞组合使用。
为了解决calcein am的这种颜色限制,我们开发了calcein orange ,calcein red 和calcein deep red 。
这些新的calcein am类似物与calcein am结合使用,可以对活细胞进行多色标记和功能分析。
非荧光calcein red am可以轻松进入活细胞并水解产生强荧光calcein red 染料。可以使用常见的tritc / cy3滤波片组检测calcein red 染料。百萤生物是aat bioquest的中国代理商,为您提供优质的钙黄绿素红,am。
光谱:
2.适用仪器
流式细胞仪
ex:532/561 nm
em:585/40 nm
荧光显微镜
ex:tritc 滤波片组
em:tritc 滤波片组
推荐孔板:黑色透明底板
荧光酶标仪
ex:540 nm
em:590 nm
cutoff:570 nm
推荐孔板:黑色透明底板
读取模式:底读模式
3.实验方案:
操作步骤
1.准备hhbs缓冲液,10%pluronic®f-127溶液和25 mm probenecid溶液。
2.在高质量无水dmso中制备2 mm至5 mm calcein red am原液。
2.1使用calcein red am的量:1毫克
2.2所需浓度:2 mm
2.3在合适的容器中,将1mg calcein red tm am与492.23μl无水dmso混合。
3.使用10μmcalceinred am 4在hhbs中制备2x工作溶液,0.08%pluronic®f-127和2 mm*磺舒。
3.1终孔内浓度的calcein red am:5μm
3.2pluronic®f-127的终井内浓度:0.04%
3.3终孔内浓度的*磺舒:1mm
3.4在合适的容器中,混合16μl的calcein red am,25.6μl的10%pluronic f-127和256μl的25mm*磺舒。然后,添加hhbs或您选择的缓冲液,直到体积为3.2 ml。
注意:对于大多数细胞系,我们建议calcein red am的终度为4至5μm。
注意:推荐的pluronic f-127孔浓度为0.02%至0.04%。
注意:推荐的浓度为1至2.5 mm的probenecid。
4.将100μl染料工作溶液加入已经含有100μl培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2x稀释至1x,并将每种组分的终浓度调节至以下:5μm的calcein red am,0.04%pluronic f-127,1mm*磺舒。
5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-60分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
6.用1.0 mm probenecid准备hhbs缓冲液(或您选择的缓冲液)。
6.1在合适的容器中加入160μl的25mm*磺舒。然后,添加hhbs或您选择的缓冲液,直到体积为4 ml。
7.用hhbs缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液,使用1.0 mm probenecid。
7.1首先,从所需孔中除去200μl染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μl含有1.0mm*磺舒的hhbs(或您选择的缓冲液)。
8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以ex / em = 560/574 nm运行实验
5.相关产品
产品名称 货号
钙红素醋酸盐 cat#22010
钙黄绿素, am cat#22002
钙黄绿素, am 超纯级 cat#22003
关键词:荧光显微镜 荧光酶标仪 细胞培养箱 流式细胞仪