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FBS的灭活与分装

1.化冻
将血清(fetal bovine serum,hyclone)从- 20℃冰箱取出,放于4℃冰箱化冻过夜;也可室温(或浸于自来水中)化冻,化冻后若不马上灭活,可以放入4℃冰箱暂时保存;
2.灭活
(1) 放入室温的水浴锅内开始加热(同时放入一个内装200 ml自来水的血清瓶,插入一根温度计,温度监控以此为准);
(2) 当温度计显示56℃时,控制在此温度30分钟±3分钟;若不小心使温度上升超过56℃,则:若仍未超过60℃,且时间很短(比如:不超过5分钟),则仍可使用;若超过60℃,或者时间较长,则弃去不用,或者尝试用于me细胞的培养; (2) 取出,自然冷却至室温(约需1-3小时),可分装或-20℃继续冻存;
3.分装
(1)转入细胞间,用移液器将血清分装,注意预先要将血清轻轻摇动数周、混匀;吹出血清时要注意:不要吹出气泡(血清很粘稠,很容易产生气泡;如果已产生气泡,则在酒精灯火焰上过一下);标好批号和日期;
(2)放入-20℃冰箱冻存(分装一次大约可以使用1—2个月)。
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