人寡克隆区带elisa 检测试剂盒
本试剂仅供研究使用 标本:血清或血浆
试验原理:
ocb试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(elisa).已知ocb浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将ocb和*标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的hrp。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物a、b,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中ocb的浓度呈比例关系。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
避免直接接触终止液和底物a、b。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
人寡克隆区带elisa 检测试剂盒
操作注意事项
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物a、b液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物a应挥发,避免长时间打开盖子。底物b对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取od值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----edta、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人寡克隆区带elisa 检测试剂盒
操作步骤
使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-hrp,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入底物a、b各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的od值。
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。
试剂盒性能
1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数r值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
人寡克隆区带elisa 检测试剂盒
结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的od值
2、以吸光度od值为纵坐标(y),相应的ocb标准品浓度为横坐标(x),做得相应的曲线,样品的ocb含量可根据其od值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-400pg/ml
4、敏感度: 1.0 pg/ml
nr2a/nmdar2a(glutamate receptor2a) *受体2a抗体(n端)0.2ml
goat anti-chi igm/pe 荧光素pe标记羊抗鸡igm0.1ml
rb fitc/pe 荧光素pe标记兔抗fitc0.1ml
goat anti-human iga/pe 荧光素pe标记羊抗人iga0.1ml
goat anti-human igm/pe 荧光素pe标记羊抗人igm0.1ml
nr2b/nmdar2b(n-methyl-d-asprtate receptor 2b) *受体2b抗体0.2ml
nr2c/nmdar2c(n-methyl-d-asprtate receptor 2c) *受体2c抗体0.2ml
nr2d/nmdar2d(n-methyl-d-asprtate receptor 2d) *受体2d抗体0.1ml
nr2d/nmdar2d(n-methyl-d-asprtate receptor 2d) *受体2d抗体0.2ml
n-ras 原癌基因抗体0.1ml
n-ras 原癌基因抗体0.2ml
nrf2 (nuclear factor-e2 related factor2) 核因子2相关因子2抗体0.2ml
monkey igm/cy3 荧光素cy3标记猴igm0.1ml
mouse igm/cy3 荧光素cy3标记小鼠igm0.1ml
pig igg/cy3 荧光素cy3标记猪igg0.1ml
pig igm/cy3 荧光素cy3标记猪igm0.1ml
mink igg/cy3 荧光素cy3标记水貂igg0.1ml
rabbit igm/cy3 荧光素cy3标记兔igm0.1ml
nrf-1(nuclear respiratory factor-1) 核呼吸因子-1抗体0.1ml
nrf-1(nuclear respiratory factor-1) 核呼吸因子-1抗体0.2ml
cd303/bdca-2/clec4c(c-type lectin domain family 4 member c) c型凝集素结构域家族4成员c抗体0.2ml
cd304/bdca-4/nrp-1(neuropilin-1) 神经纤毛蛋白-1抗体0.2ml
nrp-2(neuropilin-2) 神经纤毛蛋白-2抗体0.2ml
nrsf/rest(neural-restrictive silencer factor) 神经元抑制蛋白抗体0.2ml
nsbp1(nucleosome-binding protein 1) 核小体结合蛋白1抗体0.2ml
nse (neuron specific enolase) 神经元特异性烯醇化酶抗体0.2ml
nt-3 神经营养因子-3抗体0.1ml
nt-3 神经营养因子-3抗体0.2ml
nt-4/nt-5(neurotrophic factor 4/5) 神经生长因子4/5抗体0.2ml
ntcp(na+/taurocholate cotransporting polypeptide) 钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白0.2ml
ntn(neurturin ) 神经生长因子抗体0.2ml
ntn1(netrin-1) 轴突导向因子1抗体0.2ml
nurr1 核受体相关因子-1抗体0.2ml
oas1(2',5'-oligoadenylate synthetase 1) 寡腺苷酸合成酶-10.1ml
aact/cy3 荧光素cy3标记胰*0.1ml
goat anti-human fibrinogen/cy3 荧光素cy3标记羊抗*0.1ml
