人抗酿酒酵母抗体(asca)酶联免疫分析试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48t的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48t的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂a50μl,再加入显色剂b50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(od值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体phospho-ask1 (ser1033) 0.1ml
有丝分裂激酶a/b/c抗体aurora a+b+c 0.2ml
磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体phospho-alk (tyr1278 + tyr1282 + tyr1283) 0.1ml
磷酸化adp核糖基化因子结合蛋白2抗体phospho-arfaptin 2 (ser260) 0.1ml
磷酸化有丝分裂激酶b/c抗体phospho-aurora b (thr232) + aurora c (thr198) 0.1ml
磷酸化腺泡acinus蛋白抗体phospho-acinus (ser1180) 0.1ml
磷酸化肾上腺素能受体β2抗体phospho-adrb2 (ser346) 0.1ml
aps抗体aps 0.1ml
激活素受体样激酶1抗体acvrl1 0.2ml
激活素a受体1b抗体acvr1b 0.2ml
