造成液相色谱柱柱压升高的可能原因有很多。一般是由于色谱柱筛板或柱头发生了堵塞,造成流动相阻力加大所引起。当然色谱系统其他部分发生堵塞,也可能表现为柱压(系统压力)升高。所以在发现系统压力升高时,可首先使用两通短接色谱柱观察相同条件下系统本压是否正常,排除压力升高为系统其他部分造成。
1液相色谱柱筛板堵塞,这往往是由于流动相没有过滤,或虽已过滤但滤膜孔径过大或滤片损坏,使固体杂质滞留在筛板上造成的。推荐使用(ms过滤膜)可采用反冲的方法去除堵塞物。对于 5 或 3.5um填料的赛分色谱柱,建议采用 0.45um 膜厚过滤样品,1.8um 填料的赛分色谱柱,请采用 0.2um膜厚过滤样品。推荐使用赛分色谱柱,又成都摩尔科学仪器有限公司专业提供,
2同样类似堵塞也会发生于排气阀过滤芯、在线过滤器和保护柱,这时建议更换成都摩尔科学仪器有限公司提供的滤芯,在线过滤器内的筛板或保护柱内的柱芯。
3非特异性吸附 当部分组分在色谱柱柱子上有较强的非特异性吸附,且当前所用的流动相难以将它们洗脱时,强保留组分的累积则会造成阻力增大和压力升高。可使用适当的溶剂冲洗以除去吸附物质。
4 样品的沉淀 当样品所用的溶剂与流动相不一致时,样品进入液相色谱柱中时有可能因溶解度降
低而沉淀出来,造成压力升高。此时建议使用对样品有较高溶解度的溶剂冲洗。
5 盐晶体的析出 使用较高浓度的缓冲液或添加有缓冲液的流动相后,如果冲洗不******,缓冲液中的无机盐成分可能会残留在体系之中。它们会因在新流动相体系中溶解度降低而析出,造成流动相阻力加大,压力升高。
6 更换流动相时置换不****** 当改换流动相体系时,不******的更换使不同性质、互不相溶的流动相存在一个体系中,也会造成压力升高。可使用混溶的溶剂(异丙醇)******冲洗。
备注:
赛分液相色谱柱冲洗建议
反相色谱柱用以下溶剂至少各 25ml 冲洗色谱柱(分析柱)
• 不含缓冲盐的流动相
• ****甲醇
• ****乙腈
• 75%乙腈+25%异丙醇
• ****异丙醇
• ****二氯甲烷 *
• ****己烷*
*若使用己烷或二氯甲烷冲洗色谱柱, 则在重新使用反相流动相以前, 必须用异丙醇冲洗色谱柱 !!!
正相色谱柱用以下溶剂至少各 50ml 冲洗色谱柱(分析柱)
• 50%甲醇+50%
• ****乙酸乙酯
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成都摩尔科学仪器有限公司提供的产品系列包括:各类食品检测和药品检测涉及的从分析到制备等规格齐全、填料齐全的液相色谱柱、气相色谱柱、 纯化填料、品种规格齐全样品前处理固相萃取柱和免疫亲和柱;检测的色谱柱以及纯化用的系统成套设备和各种填料;同时,成都摩尔科学仪器有限公司也是各品牌色谱柱、仪器的配件耗材(如氘灯、石墨管、单向阀等)、常规实验室消耗品(如针头过滤器(含灭菌器)、过滤膜(含除菌膜)、样品瓶(含顶空瓶)及相关盖垫、 移液器、标准品(食品和环境等)和各种分析检测仪器(如液相色谱仪、气相色谱仪、培养箱、生物安全柜、天平、ph计等综合集成供应商。
