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脱氢酶(GDH)试剂盒说明书 技术文章

当前位置:首页>生理生化试剂盒>微量酶标仪法>氮代谢系列>*脱氢酶(glutamate dehydrogenase,gdh)活性检测试剂盒
*脱氢酶(glutamate dehydrogenase,gdh)活性检测试剂盒商品货号:ms1803
英文名称:micro glutamic acid dehydrogenase(gdh)assay kit
别名:*脱氢酶试剂盒 gdh kit *脱氢酶(gdh)试剂盒 *脱氢酶(gdh)测试盒
检测方法:微量法
商品货号:商品品牌:规格基本售价选择规格
ms1803 -100管/96样 索桥生物 100管/96样 ¥1100.00元
产品详细介绍
测定意义:
gdh(ec 1.4.1.2)广泛分布于植物中,和*合成酶(gogat)共同参与*的合成,在氨同化和转化成有机氮化合物的代谢中起重要作用。
测定原理:
gdh催化nh4+、α-酮戊二酸和nadh,生成*和nad+,引起340nm吸光度下降。通过测定340nm吸光度的下降速率,计算gdh活性。
产品说明书
货号:qs1803 规格:50 管/48 样
*脱氢酶(glutamate dehydrogenase,gdh)试剂盒说明书 紫外分光光度法
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
gdh(ec 1.4.1.2)广泛分布于植物中,和*合成酶(gogat)共同参与*的合成, 在氨同化和转化成有机氮化合物的代谢中起重要作用。
测定原理:
gdh 催化 nh4 +、α -酮戊二酸和 nadh,生成*和 nad+,引起 340nm 吸光度下降。通过 测定 340nm 吸光度的下降速率,计算 gdh 活性。
自备实验用品及仪器:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1ml 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体 60ml×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 60ml×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 支,4℃保存;
试剂三:粉剂×1 支,4℃保存;
试剂四:粉剂×1 支,-20℃保存。
粗酶液提取:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(10^4 个):提取液体积(ml)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1ml 提取液),超 声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200w,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃ 离心 10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织, 加入 1ml 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
血清(浆)样品:直接检测。
测定步骤:
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。
2、样本测定
(1)工作液的配制:临用前将试剂二、三、四转移到试剂一中混合溶解,置于 37℃(哺乳动 物)或 25℃(其它物种)水浴 5min;现配现用;
(2)取 0.05ml 样本和 1ml 工作液于 1ml 比色皿中,混匀,加工作液的同时开始计时,在 340 nm 波长下记录 20 秒时的初始吸光度 a1 和 5 分 20 秒时的吸光度 a2,计算 δ a=a1-a2。
gdh 活性计算:
1、血清(浆)中 gdh 活力的计算:
单位的定义:每毫升血清(浆)每分钟消耗 1 nmol nadh 定义为一个酶活力单位。 gdh(nmol/min/ml)=[δ a×v 反总÷(ε ×d)×10^9 ]÷v 样÷t=675×δ a
2、组织、细菌或细胞中 gdh 活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每 mg 组织蛋白每分钟消耗 1 nmol nadh 定义为一个酶活力单位。
gdh(nmol/min /mg prot)=[δ a×v 反总÷(ε ×d)×10^9 ]÷(v 样×cpr) ÷t=675×δ a÷cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每 g 组织每分钟消耗 1 nmol nadh 定义为一个酶活力单位。
gdh ( nmol/min /g 鲜 重 ) = [δ a×v 反 总 ÷ ( ε ×d ) ×10^9 ]÷(w× v 样 ÷v 样 总 ) ÷t=675×δ a÷w
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每 1 万个细菌或细胞每分钟消耗 1 nmol nadh 定义为一个酶活力单位。 gdh(nmol/min /10^4 cell)=[δ a×v 反总÷(ε ×d)×10^9 ]÷(v 样÷v 样总×500) ÷t=1.35×δ a
v 反总:反应体系总体积,1.05×10^-3 l;ε :nadh 摩尔消光系数,6.22×10^3 l / mol /cm; d:比色皿光径,1cm;v 样:加入样本体积,0.05 ml;v 样总:加入提取液体积,1 ml;t: 反应时间,5 min;cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;w:样本质量,g;500:细菌或细胞总数, 500 万。
系列产品及价格
氮代谢系列        
qs1800 硝酸还原酶(nr)测试盒 可见分光光度法 50管/24样 240
ms1800 硝酸还原酶(nr)测试盒 微量法 100管/48样 450
qs1801 *合成酶(gogat)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 500
ms1801 *合成酶(gogat)测试盒 微量法 100管/96样 950
qs1802 *酶(gls)测试盒 可见分光光度法 50管/48样 580
ms1802 *酶(gls)测试盒 微量法 100管/96样 1100
qs1803 *脱氢酶(gdh)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 580
ms1803 *脱氢酶(gdh)测试盒 微量法 100管/96样 1100
qs1805 水土中亚硝酸盐含量测试盒 可见分光光度法 50管/48样 140
ms1805 水土中亚硝酸盐含量测试盒 微量法 100管/48样 270
qs1806 食品中亚硝酸盐含量测试盒 可见分光光度法 50管/48样 200
ms1806 食品中亚硝酸盐含量测试盒 微量法 100管/96样 380
qs1807 *合成酶(gs)测试盒 可见分光光度法 50管/24样 280
ms1807 *合成酶(gs)测试盒 微量法 100管/48样 550
qs1808 植物硝态氮测试盒 可见分光光度法 50管/48样 360
ms1808 植物硝态氮测试盒 微量法 100管/96样 700
qs1811 植物氨态氮测试盒 可见分光光度法 50管/48样 500
ms1811 植物氨态氮测试盒 微量法 100管/96样 960
qs1812 尿素氮测试盒 可见分光光度法 50管/48样 70
ms1812 尿素氮测试盒 微量法 100管/96样 100
qs1813 亚硝酸还原酶(nir)测试盒 可见分光光度法 50管/24样 650
ms1813 亚硝酸还原酶(nir)测试盒 微量法 100管/48样 1250
qs1814 脲酶(ue)测试盒 可见分光光度法 50管/24样 380
ms1814 脲酶(ue)测试盒 微量法 100管/48样 750
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