细胞培养相关问题:
1 冷冻管应如何解冻?
取出冷冻管后,须立即放入37°c水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化, 并注意水面不可超过冷冻管盖沿, 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。
2 细胞冷冻管解冻培养时,是否应马上去除dmso?
除少数特别注明对dmso 敏感之细胞外,绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞),在解冻之后,应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中,待隔天再置换新鲜培养基以去除dmso 即可,如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。
3 可否使用与原先培养条件不同之培养基?
不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活。
4 可否使用与原先培养条件不同之血清种类?
不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生*的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
5 何谓fbs,fcs,cs,hs?
fbs(fetal bovine serum)和fcs (fetal calf serum)是相同的意思,两者都是指胎牛血清,fcs 乃错误的使用字眼,请不要再使用。cs(calf serum)则是指小牛血清。hs(horseserum)则是指马血清。
6 培养细胞时应使用5%或10%co2?或根本没有影响?
一般培养基中大都使用hco3-/co32-/h+作为ph 的缓冲系统,而培养基中nahco3 的含量将决定细胞培养时应使用的co2 浓度。当培养基中nahco3 含量为每公升3.7 g时,细胞培养时应使用10 % co2;当培养基中nahco3为每公升1.5g时,则应使用5 %co2培养细胞。
7 何时须更换培养基?
视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上之更换时间,按时更换培养基即可。
8 培养基中是否须添加抗生素?
除于特殊筛选系统中外,一般正常培养状态下,培养基中不应添加任何抗生素。
