紫外可见分光光度法测定维生素b2的方法步骤:
1、待测液的配置:取待测片剂2片,精密称定、研细,精密称取适量(约相当于维生素b210mg),置于1000ml容量瓶中,加冰醋酸5ml与水100ml,置水浴(100℃)加热1小时,时时摇振,使维生素b2溶解,加水稀释,冷却后加氢氧化钠液(1mol/l)30ml。用水稀释至刻度,摇匀,过滤;弃去初滤液,取续滤液作为待测液。
2、标准溶液的配置:准确称取75mg核黄素(维生素b2),置于1000ml容量瓶中,加少量水使维生素b2溶解,zui后加水定容至刻度得到维生素b2标准试剂(0.075mg/ml)。
3、用移液管分别吸取2ml、4ml、5ml、6ml、8ml维生素b2标准试剂(0.075mg/ml)于5个25ml容量瓶中, 加水定容至刻度,摇匀。用紫外分光光度计分别测量5个容量瓶中的vb2稀释液,得到5个吸收度数值a444nm。
4、以vb2稀释液浓度为横坐标,a444nm数值为纵坐标,建立vb2浓度与吸收度的标准曲线,然后在444nm波长处测出待测液的吸收度数值,在标准曲线上找到相应的浓度数值即可。
关键词:紫外分光光度计
