甘油三酯,它是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,也是人体内含量最多的脂类,大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量,同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成,在脂肪组织中贮存。它不仅是细胞膜的主要成分,也是重要的呼吸底物和供能物质,在脂肪酸运输过程中具有重要作用。血清中内源性三酰甘油主要以vldl的形式运输,外源性三酰甘油主要以cm的形式运输,甘油三酯含量的增高与动脉粥样硬化性心血管疾病密切相关。
甘油三酯经koh皂化水解生成甘油及脂肪酸,过碘酸氧化甘油生成甲醛,在铵离子存在下甲醛能够与乙酰丙酮缩合生成黄色物质,产物在420nm处具有特征吸收峰,通过吸光值的变化即可定量检测甘油三酯的含量。
甘油三酯(tg)的提取(可根据预实验结果适当调整样本量及比例)
1、细菌或细胞:离心收集细菌或细胞至离心管内,按照细菌或细胞数量(10⁴个):试剂一体积(ml)为(500-1000):1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml试剂一)处理样品,冰浴超声破碎(功率20%或200w,超声2s,间隔1s,总时间1min),4℃8000g离心10min,取上清待测。
2、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(ml)为1:(5-10)的比例(建议称取0.1g组织,加入1ml试剂一)处理样品,冰浴匀浆,4℃8000g离心10min,取上清待测。
3、血清(浆)、培养液等液体样本:直接测定或适当稀释后再进行测定。
甘油三酯试剂盒先利用脂肪酶水解甘油三酯形成甘油和脂肪酸,然后利用双酶联反应系统将释放出来的甘油用比色法检测。是基于比色法来检测血清和血浆里面的甘油三酯的含量,检测的吸光度值在540nm处检测,储存条件是-20度,稳定期是6个月。