目的
使用沃特世（waters®）acquity upc-squared™系统将药典中*含量的正相hplc测定方法转换为超临界流体色谱（sfc）方法。
背景
目前，美国药典（usp）规定了含有*（4,4’-二氨基二苯砜，cas#80-08-0）药物片剂的正相hplc分析方法。使用4.0x300mm，10µm的硅胶柱（l3）进行等度分离，流动相为正己烷、异丙醇、乙腈和乙酸乙酯（7:1:1:1）的混合溶液。该方法的运行时间约为12.5min（zui后一个主峰出峰时间的2倍，流速1.5ml/min）。如大多数药典中的方法一样，本方法经过验
证且可靠。但是，该方法使用了正己烷和乙酸乙酯溶剂。出于健康、安全和环保的原因，许多实验室都想减少这些溶剂的使用。超临界液体色谱（sfc）是一种正相色谱分离技术，其使用co2作为主流动相，以极性溶剂（如甲醇）作为改性剂。由于sfc的原理与hplc的原理相似，因此，目前的方法应该能够转换成sfc方法，减少溶剂的消耗和处理，降低每次分析的成本，同时增强了健康、安全和环境方面的保护。转换成sfc的色谱方法必须保持数据质量，而且必须得到与目前正相色谱
方法一致的实验结果
对寻求更、更低成本的*片分析方法的实验室而言，acquity upc-squared系统不愧为理想之选，该方法同时加强了健康、安全和环境方面的保护。
解决方案
使用目前美国药典（usp）方法，制备和分析*标准品和片剂样品，如图1所示（该样品也用于sfc分析）。使用目前usp方法的分析结果与使用acquity upc2方法得到的结果进行对比，如图2所示。
sfc方法的条件如下：
色谱柱：acquity upc 2beh，3.0x50mm，1.7µm
柱温：45°c
流动相：85%co2:15%meoh
流速：3.0ml/min,
背压：130bar/1885psi
检测器：uv/pda，254nm
药典方法所列出的适应性条件是zui低要求（相对标准偏差不得大于2%）。标准品6次重复进样，目前正相hplc方法得到的保留时间和峰面积的相对标准偏差（%）分别为<0.1%，<1.1%。超合相色谱方法ultra performance convergence chromatography™（upc-squared）重复6次进样得到的实验结果符合usp药典系统适应性要求（保留时间rsd值0.8%，峰面积rsd值0.9%），且运行速度（1.75min）大大加快。两种方法测定片剂样品的分析结果高度一致。本例中，每次正相hplc分析使用正己烷13.1ml，异丙醇、乙腈和乙酸乙酯各1.9ml。相比之下，upc2方法仅消耗约0.50ml甲醇。这说明了通过将正相
色谱方法转换为upc-squared方法可以大大地减少有机溶液的使用。根据目前的溶剂价格，每次正相色谱hplc分析成本大约为1.08美元；相比之下，upc-squared仅为0.01美元。
总结
使用acquity upc-squared，可以成功地将美国药典的hplc方法转换为upc-squared方法。这种新的upc-squared方法得到的数据与目前的hplc方法相当，甚至更好；速度是目前的hplc方法的7倍，并且消耗的溶剂更少。我们以更快的速度得到高品质的分析数据，则实验室生产率提高，每个样本的分析成本降低。acquity upc-squared系统是实验室将目前的正相hplc方法转换为更、更省钱的upc-squared的方法的一种理想的解决方案，同时也增强了健康、安全和环境方面的保护。