细胞增殖-毒性检测试剂盒
cell counting kit-8 (cck-8)
产品编号
产品名称
規格
sp8702-100t
cck-8细胞增殖-毒性检测试剂盒
100 孔,1ml
sp8702-500t
cck-8细胞增殖-毒性检测试剂盒
500孔，5x1ml
产品简介：
cck-8试剂盒，是一种基于wst-8的广泛应用于细胞増殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。wst-8是一种类似于mtt的化合物。在电了耦合试剂1-methoxypms存在的情况下。可以被还原生成橙黄色水溶性的甲臜(formazan)。细胞増殖越多越快，则颜色越深：细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞.颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
使用方法：
1、在96孔板中接种细胞悬液(100ul/孔).通常细胞增值实验每孔约2000个细胞.细胞毒性实验每孔约5000个细胞.具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞増殖速度的快慢等因素决定。
2、按照实验需要.进行培养并给予0-10ul特定的药物刺激，处理一段适当的时间(例如:6.12.24或48 小时)。
3、每扎加入1oul cck-8溶液。如果起始的培养体枳为200ul，刻需加入2oul cck-8溶液，以此类推。可以用加相应量的细胞培养基和cck-8但不加细胞的孔作为空白对照,若担 心所使用的药物会干扰检测，需设置加相应量细胞培养液、药物和cck-8溶液，但不加细胞的孔作为空口对照。
4、在细胞培养箱内继续孵育1-4小时，具体时间而以通过预实验确定.預实验时可以在0.5、1、2和4小时后分别用酶标仪检测，然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。
5、用酶标仪测定在450nm处的吸光值，若无450nm滤光片.可以使用420-480nm的滤光片。如果样品为高浑浊度的细胞悬液，可以使用大于600nm的波长，例如650nm，作为参考波长进行双波长测定。
6、如果浴要哲时不测定od值，可以向每孔中加入loul0.1m hcl溶液或者1%w/v的sds溶液，避光保存在室溫，24小时内吸光度不会发生变化。
实验结果分析：
细胞活力=[0d（加药）-0d（空白）]/[od（0加药）-0d（空白）]x
抑制率=[od（0加药）-od（加药）]/[od（0加药）-od（空白）]x
od（加药）：具有细胞、培养基、cck-8溶液和药物溶液的孔的吸光值
od（空白）：具有培养基、cck-8溶液，没有细胞的孔的吸光值
od（0加药）：具有细胞、培养基、cck-8溶液，没有药物溶液的孔的吸光值
注意事项：
1、使用96孔板进行检测时，如果细胞培养时间较长，请注意蒸发问题。可将96孔板外围一圈加培养基、水或pbs保湿。同时，可以把96孔板置于培养箱内靠近水盘的位置以缓解蒸发。
2、培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而不同。在正式实验前，建议先做预实验摸索铺板的细胞数量以及加入cck-8试剂后的培养时间。
3、铺板时请注意保证每个孔细胞数量均匀，建议铺板过程中注意时常混匀，防止因细胞沉淀造成不均匀。加入cck-8后请前后左右轻轻晃动培养板数次，使培养基和cck-8溶液充分混匀。
4、本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应，如果待测物质有氧化性或还原性，可在加cck-8之前更换新鲜培养基，去掉药物的影响。若药物影响比较小的情况可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
5、加入cck-8时，如果细胞培养时间较长，培养基颜色或ph值已变化，建议换用新鲜的培养基。
6、用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。
7、本试剂盒系无菌灌装生产。在使用过程中，请在生物安全柜内无菌操作，避免污染。
8、为了您的健康和安全，请穿着实验服并戴一次性手套或乳胶手套操作。
保存方法：
0-5℃避光保存，保存建议-20℃，但不能反复冻融。
0-5℃条件下可保存一年。
关键词：细胞培养箱 酶标仪 培养箱 生物安全柜 胶手套