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蛋白磷酸酶抑制剂混合液III型反应五要素

蛋白磷酸酶抑制剂混合液iii型反应五要素:
参加pcr反应的物质主要有五种即引物、酶、dntp、模板和mg2+
引物:引物是pcr特异性反应的关键,pcr 产物的特异性取决于引物与模板dna互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板dna序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用pcr就可将模板dna在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:g+c含量以40-60%为宜,g+c太少扩增效果不佳,g+c过多易出现非特异条带。atgc最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致pcr失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
转录因子e2f-1抗体
内皮素转化酶1抗体
细胞外基质蛋白1抗体
外胚层发育不良抗体
e2 tag标签抗体
铁螯合酶抗体
dh5α大肠杆菌菌体蛋白抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体
上皮细胞粘附分子抗体
表皮生长因子抗体
表皮生长因子受体3抗体
上皮钙粘附分子抗体
红细胞生成素受体抗体
脑啡肽抗体
eid2蛋白抗体
上皮细胞粘附分子抗体
红细胞膜相关蛋白ermap抗体
腺样癌特异性相关抗原抗体emc1抗体
腺样癌特异性相关抗原抗体emc1抗体
染色体区域稳定蛋白/核输出蛋白1抗体
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