反相柱*拿到手时应注意些什么?反相柱*使用十分关键,现在用的多的就是反相c18色谱柱,在平时的工作中,我们累积了一些反相柱*应用小经验,特给分享大家:
当我们每次新买的反相柱虽然是经厂家测试过并密封好的,可是有的柱子到达手中时已经过很长的时间了,因此,我们每拿到一根新的色谱柱都必须要对柱子进行处理。首先,是配制好65%的乙腈/水,再把色谱柱正确的连接在色谱仪上,出口放空(注意出口端切不可连上检测器,以免污染了检测器),以低流速0.1ml/min~0.5ml/min(如果是lc/mc柱子,则应以0.3ml/min进行)均可,不可以高流速进行,等看见柱子出口有液体流出后,过20分钟后再接上检测器,以循序渐进的方法将流速调至1.0ml/min(如果是lc/mc柱子则应以0.3ml/min进行),继续冲洗2-8小时。
对于新反相柱的使用:
首先我们确认所分析样品流动相的ph是不是在色谱柱ph的耐受范围之内,以免损伤柱子!如果,确认在柱子的使用范围之内,就用做样品的流动相平衡柱子(如果流动相中含用缓冲盐溶液,在平衡柱子之前务必要先用5%甲醇或5%乙腈去过渡30分钟以上。再用带盐的流动相去平衡色谱柱)。当色谱柱平衡了足够时间,基线非常平稳的时候,方可进样分析。不管是分析什么样的产品,由于各种各样的因素,样品中总有杂质。因此,在色谱柱前端加上保护柱,以增加色谱柱的使用寿命!