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胱天蛋白酶Caspase 系列产品实验方案

产品型号:13406.13407.13408.13409
fitc-c6(c3)-devd-fmk能提供简便灵敏的方法对活细胞中对的caspase进行检测。fitc-c6(c3)-devd-fmk在凋亡细胞中具有通透性,性和不可逆结合的caspase-3的特点,是带有fitc荧光标记的caspase-3抑制剂。fitc标记能直接通过荧光显微镜,流式细胞仪或者荧光酶标仪测定的caspase。百萤生物是aat bioquest的中国代理商,为您提供优质的胱天蛋白酶caspase 3/7荧光底物 fitc-c6(c3)-devd-fmk 绿。
实验方案
操作方法
以下协议仅提供指导,应根据您的特定需求进行修改。
使用amc,afc,pna,r110和prored底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定
1.在dmso中准备10 mm的储备溶液。
2.如下准备2x半胱天冬酶底物(50 µm)分析溶液:50 µl底物原液,100 µl dtt(1m),400 µl edta(100 mm),10 ml tris buffer(20 mm),ph = 7.4。
3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2x半胱天冬酶底物测定溶液混合,并在室温下孵育至少1小时。
4.使用荧光酶标仪监测荧光,或使用酶标仪监测吸光度。
使用细胞渗透性fmk caspase探针的细胞caspase测定
1.在dmso中准备2-5 mm的储备溶液。
2.根据需要处理细胞。
3.通过用20 mm hepes缓冲液(hhbs)在hanks中稀释dmso储备溶液(来自步骤2.1),制备2x渗透性半胱天冬酶底物(20 µm)分析溶液。
4.将等体积的处理过的细胞与2x半胱天冬酶底物测定溶液混合(来自步骤2.3),并在37°c,5%co2的培养箱中孵育细胞至少1小时。
5.用hhbs清洗细胞至少一次。
6.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。
使用细胞渗透性fmk caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定(仅适用于#13470-13476)
1.通过向小瓶中加入50 µl dmso制备250x储备液。
2.根据需要处理细胞。
3.以1:250的比例将250 x dmso储备溶液添加到细胞溶液中(例如2 µl至500 µl细胞),并将细胞在37°c,5%co2的培养箱中孵育1小时。
4.用hhbs清洗细胞至少一次。
5.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。
关键词:培养箱 酶标仪 流式细胞仪 荧光显微镜 荧光酶标仪
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