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荧光定量PCR实验时的好方法

实时荧光定量pcr技术实现了pcr从定性到定量的飞跃,具有特异性更强、有效解决pcr污染问题、自动化程度高等特点,成为核酸分子定量的标准方法。在做荧光定量pcr实验时建议使用这些耗材:96孔光学反应板配合光学膜,0.2ml光学八联反应管配合光学膜,0.2ml光学八联反应管配合平盖的光学八联管盖等。在做荧光定量pcr实验时有一些好的方法分享给大家,例如在使用单管或者8连管做实验时,如果在样本数量不多的时候,建议在样品加热块(tray)上对称的安放样品,并且先放在第6列或者第7列,然后逐渐向两边放置。这样热盖压下来的时候不至于发生倾斜,每个反应管的受力和受热都比较均匀,提高了孔与孔之间的数据精密性。又例如使用96孔板做实验的时候,建议使用光学膜代替盖子来密封反应孔。封膜的方法要先沿着96孔板的纵向压膜,然后在横向,后在沿着板的边缘按压密封。pilot5-8t冻干机应用示例(荧光pcr冻干):
探针、底物、引物原料要求确定。冻干溶液配方开发,采用正交法或响应曲面法进行辅料筛选。选择适合的包材和模具。设计冻干曲线配合辅料筛选。确定配方及工艺。稳定性测试。根据稳定性测试结果修正工艺或配方。整个环节注意环境、设备、人员的结合。
型号
pilot3-6t
pilot5-8t
pilot7-12t
pilot10-15t
冻干面积
0.42㎡
0.56㎡
0.84㎡
1.05㎡
∅22西林瓶装量(20ml)
≥900支
≥1170支
≥1500支
≥2100支
∅16西林瓶装量(5ml)
≥1700支
≥2210支
≥3100支
≥4100支
冷阱温度(空载)
-85℃
真空度(空载)
≤1pa
板层温度(空载)
-55℃
板层制冷方式
硅油循环
板层数量
3+1
4+1
4+1
5+1
板层尺寸(mm)
350*400
350*400
350*600
350*600
捕水能力
6l
8l
12l
10l
冻干效率
3l/24h
5l/24h
7l/24h
10l/24h
板层间距
100mm
80mm
90mm
100mm
穿墙隔离




冻干曲线拟合度
100%
100%
100%
100%
晶型控制




蒸汽分压控制




升华结束判定




冻干终点测试




压塞
液压
整机尺寸 (约)
w860*d1400*h1800
w860*d1400*h1800
w860*d1700*h1900
w860*d1700*h1900
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