elisa检测试剂盒平端连接要求的条件：
1、低浓度（0.5mmol/l）的atp(ferretti和sgaranekka，1981）。
2、不存在亚精胺一类的多胺。
3、*浓度的连接酶（50weiss单位．ml）。
4、高浓度的平端。
平端dna连接缺点：
1、连接效率比粘性末端低：连接效率之所以比较低，原因之一是在连接过程中只有连接酶的作用，缺乏粘性末端那样突出碱基的互补作用；原因之二是常用的t4dnaligase对于平末端的km值比粘性末端高1000倍。
2、可能产生双向插入：由于平端连接的末端没有特异性，连接的时候不能定向，所以两种方向的插入都有可能。这个时候就需要有一种有效的鉴定方法。一般分别在载体和目的片段选择一个酶切位点进行酶切鉴定，当然，具体的鉴定方法要根据具体的实验而定。
3、可能多拷贝插入：平端连接时，可能目的片段多个插入，并且在多个插入的时候还有可能每个插入子以不同方向连接，导致有时候结果难以解释。一般目的片段越大，多拷贝插入的可能就越小。
elisa检测试剂盒平端dna连接优点：
1、没有连不上的，只有切不开的。平末端连接不牵扯到粘性末端的碱基突出问题，所以，理论上任何两条dna序列都能连接在一起，当然需要ligase的酶学作用。这个不同dna分子之间的连接带来了极大地便利，因为平末端自然是这样，而如果遇到5‘或者3’突出的粘性末端，也可以经过处理成为平末端。
2、有时候，两个平末端连接在一起以后，可以产生另一种内切酶的识别序列，为后续的克隆工作提供了一种机会。
2-羟基咔唑 号： 86-79-3
硫氢化钠，水合 号： 207683-19-0
6-吗啉烟酰氯 号： 313350-36-6
4-(三氟甲基)苄胺 号： 3300-51-4
2,4,6-三氟吡啶 号： 3512-17-2
5-溴戊酰氯 号： 4509-90-4
1-(3-氨基丙基)咪唑 号： 5036-48-6
2-溴丙酰氯 号： 7148-74-5
n-(3'-丙胺基)-2-吡咯烷酮 号： 7663-77-6
α,4-二溴苯乙酸乙酯,98% 号： 77143-76-1
4-(三氟甲氧基)苯磺酰氯 号： 94108-56-2
2-(三氟甲氧基)苯磺酰氯 号： 103008-51-1
4-苯氧基苄胺 号： 107622-80-0
双（2-甲氧乙基）胺 号： 111-95-5
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