从茶树中获得β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,β-1,3-glu)基因cdna,发现其中存在着一些序列,它们与核糖体竞争性地结合pet32a载体上的rbs位点,造成该基因cdna在原核生物中很难表达。作者对其中的两处基因序列进行了突变,通过设计pcr引物,利用密码子的简并性,保证了突变后蛋白质的一级结构不变。使葡聚糖酶基因在大肠杆菌中明显表达。通过sds-page分析,证明表达产物分子量约75.8kd,与预计大小一致,并通过水杨酸法对其进行酶活测定,证明其有活性。完成机构:[1]安徽农业大学农业部茶叶生物化学与生物技术重点实验室,合肥230036 [2]安徽农业大学生命科学学院,合肥230036