斑点气单胞菌pcr检测试剂盒使用步骤：
一、样品 dna 的制备
1. 用自选方法纯化样品的 dna，本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
2. 如果有 n 个样品，则需要进行 n+2 个样品提取，多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。如果用本试剂盒自带的dna 释放剂试用装。则按下面步骤操作：
3. 配制溶液 a 工作液。以配制 1ml 工作液(足够 10 个样品)为例：在一干净塑料管中加入 10ul 溶液 a 成分一，20ul 溶液 a 成分二和 970ul 超纯水，充分混合均匀即可。溶液 a 工作液可室温放置，但*在一周内用完，不要*放置。一次检测一个样品需要 100ul 溶液 a 工作液，1ml 工作液足够 10 个样品。如果待测样品数量为其他数字，配制的溶液 a 工作液的体积需要做相应的调整。
4. 在标记好的 n+2 个离心管中，加入 1-5mg 固体样品(半粒芝麻大小)或 5ul 液体样品待测样品。在样品制备阳性对照中加入 5ul 阳性对照，在样品制备阴性对照中加入 5ul 水。
5. 在每个管中加入 100 ul 溶液 a 工作液，确保固体样品被溶液淹埋，如果是液体样品则震荡混匀。
6. 95℃保温 10 分钟。
7. 待冷却到常温后加入 10ul 溶液 b 并混匀得 dna 释放液。每个样品得到的 dna释放液足够进行 50-100 次 pcr。
二、弓形杆菌属通用pcr试剂盒 设置 pcr 反应(40 ul 体系)
8. 在 n+2 个 pcr 管中加入下列成分，下面以样品数为 1 举例(注意：如果*次使用dna 释放剂，*每个样品设置两个模板用量的 pcr 反应，两个反应的模板使用量差 10 倍，由此确定*用量，以后就用效果*的那个模板用量)：
9. 轻柔混匀后上机，按下面参数进行 pcr。
10. 电泳检测 pcr 产物。预期的 pcr 产物长度为 216bp。阳性对照必须有此条带出
现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，需要用通用引物(如真核生物专一 pcr 引物，需自备)测试是否有抑制剂或样品是否浓度达到 pcr 的要求，如果通用引物也扩不出来，需要浓缩并再次纯化 dna 样品，或者更换 dna 提取方法，直到通用引物能够扩增出预计大小的片段。