细胞:hrmecs细胞
中文名称:人视网膜微血管内皮细胞
生长特性:贴壁
培养基:ecm
冻存条件:50%基础培养基、40% fbs、10% dmso
hrmecs细胞传代:
1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,pbs缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25%yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。
2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化)直接吸掉yi酶,加3~4ml培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。
3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4):注意培养基ph值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。
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将不同发育时期的老鼠胚胎运动神经元祖细胞(以olig2为标记)取出,然后移植到鸡胚的脊椎上,并观察这些祖细胞是否还会分化成运动神经元以及寡突细胞。
晚期老鼠胚胎(e13.5)的运动神经元祖细胞只会进行寡突细胞的分化,但如果此时的运动神经元祖细胞仍具干细胞的特质,当它们在移植到早期仍会产生运动神经元的鸡胚(e2) 时,晚期的运动神经元祖细胞理论上应该还是可以同时产生运动神经元以及寡突细胞。
如果将早期老鼠胚胎 (e9.5) 的运动神经元祖细胞移植到鸡胚 (e2)后,祖细胞只会分化成运动神经元。
相反,移植晚期老鼠胚胎 (e13.5) 的运动神经元祖细胞移植到鸡胚后,却只能分化成寡突细胞,无法分化成运动神经元。也就是说,运动神经元祖细胞并不如预期般地具有干细胞的特质。
这项研究成果挑战原来有关运动神经元祖细胞分化过程的假想模式,研究人员在论文中还进一步质疑了位于中枢神经系统其它部位的祖细胞是否也具干细胞的特质。
关键词:培养箱