同猪嵴病毒梅拉哥病毒pcr检测试剂盒准备试剂与收集血样:
双重核酸试剂盒(荧光pcr法) 1. 收集标本:血清、血浆(edta 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)。
储需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 pcr 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µl、20
µl、200 µl、1000 µl)。
2.耗材:荧光 pcr 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 ml 经焦碳酸二乙酯(depc)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µl、200 µl、1000 µl)、灭菌双蒸水。
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 dna 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 pcr 产物长度为 560 bp。
3. pcr mix 中含上样染料,pcr 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
保存条件: