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小鼠细胞表面粘蛋白(Emcn)检测原理!

小鼠细胞表面粘蛋白(emcn)检测原理!
检测原理:
采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(elisa)。往预先包被小鼠细胞表面粘蛋白(emcn)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、hrp标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物tmb显色,tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠细胞表面粘蛋白(emcn)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(od 值),计算样品浓度。
产品名称:小鼠细胞表面粘蛋白(emcn)elisa检测试剂盒
规格:96t
储存:2-8℃,避光防潮保存
有效期:6个月
实验步骤(仅供参考):
1.从室温平衡60min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μl;
3.待测样本孔先加待测样本10μl,再加样本稀释液40μl;
4.随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(hrp)标记的检测抗体100μl,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物a、b各50μl,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μl,15min内,在450nm波长处测定各孔的od值。
注意事项:
1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡60分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶*溶解后再使用。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.预处理后的样本无需稀释,直接取10μl加样即可。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
本产品仅供科研实验用,不做其它用途!
关键词:酶标仪 水浴锅 恒温箱 洗板机
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