河弧菌(vf)检测试剂盒(荧光-pcr法)使用方法:
一、稀释标准曲线样品（以10e2-10e7 拷贝/μl 这 6 个 10 倍稀释度为例）。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。
1. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μl 荧光 pcr 模板稀释液，*用带芯枪头，下同）。
3. 在 7 号管中加入 5 μl 阳性对照（浓度为 1×10e8 拷贝/μl，试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10e7 拷贝/μl 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μl 1×10e7 拷贝/μl 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10e6 拷贝/μl 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μl 1×10e6 拷贝/μl 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10e5 拷贝/μl 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品dna 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 dna，本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 n 个样品，则需要进行 n+2 个样品提取，多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置qpcr 反应（20μl 体系，在样品制备室进行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复，则标记 n+9 个 pcr 管，其中 n+2 个用于上步得到的 n+2 个样品，1 个用于 pcr 阴性对照（用水做模板），6 个用于标准曲线。如果做定性分析，并且只做 1 次重复，则标记 n+4 个 pcr 管，其中 n+2 个用于上步得到的 n+2 个样品，1 个用于 pcr 阴性对照（用水做模板），1 个用于pcr 阳性对照。