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16S/18S/ITS微生物测序服务

产品介绍
微生物群落多样性分析是指利用二代高通量测序技术,对微生物的16s rdna、18s rdna以及its高变区域,或者功能基因进行测序,分析环境中细菌、古细菌以及真菌的种类组成和含量,揭示环境样品中微生物种类以及它们之间的相对丰度和进化关系,进一步探讨微生物多样性;对于研究微生物与人类医疗健康、食品安全、环境检测与治理、微生物资源的利用等有着重要的理论和现实意义。
产品分类
16s rdna测序:16s rdna为编码原核生物核糖体小亚基rrna的dna序列,存在于所有细菌染色体基因中,共包括9个可变区和10个保守区,保守序列区域反映了生物物种间的亲缘关系,而高变序列区域则能体现物种间的差异。采用hiseq或的miseq测序仪,对16s rdna某个高变区进行测序,进一步分析环境微生物中细菌或古细菌的多样性。
18s rdna测序:18s rdna为编码真核生物核糖体小亚基rrna的dna序列。在结构上分为保守区和高变区,保守区反映生物物种间的亲缘关系,高变区反映物种间的差异。
its测序:its分为两个区域:its1/its2,其中its1位于真核生物核糖体rdna序列18s和5.8s之间,its2位于真核生物核糖体rdna序列5.8s和28s之间。its序列由于自然选择压力小,因此在进化过程中能够承受更多的变异,通过对its1或者its2进行测序,可分析环境微生物中真菌的多样性。
技术流程
技术参数
测序平台:hiseq2500;miseq
测序策略:pe250
测序周期:25-40工作日
测序数据:不低于合同规定数据量
标准数据分析
● 原始测序数据预处理
● 稀释曲线(rarefaction cur ve)
● otu划分&otu注释&物种分类注释
● 物种系统发育树
● 多样性指数分析
● 物种组成统计热图
● 群落结构:otu分类
● 物种丰富程度&均匀程度(rank abundance曲线)
● 主成分分析(principal component analysis, pca)
深度数据分析
● 多样品otu分布网状图(network)
● 单因素方差分析
● 多样品o tu分布比较(venn图)
● 多样品(微生物群落)分层聚类upgma
● 样本聚类up gma可靠性support分析
● 主坐标分析pcoa(2d/3d)图
● 基于unifrac 距离的箱型图(box-plot)分析
● 含分类单元主坐标分析pcoa图(3d bi-plot)
● 差异对比nmd s分析
● 冗余分析rda(线性模型)/典型对应分析cca(单峰模型)
● 含多样品分类饼图
● lefse分析(组间比较分析)
● adonis组间比较分析(基于unifrac距离矩阵)
引物信息
样本要求
粪便:采集新鲜粪便样品于无菌容器中,每份样品5g左右即可,液氮速冻3-5min,-80°c长期保存,干冰运输。
土壤:采集土壤样本5g左右至无菌容器中,液氮速冻3-5min,然后转移至-80°c 或液氮中长期保存,干冰运输。
污泥:采集污泥样本于无菌容器中,每份样品5g左右即可,液氮速冻3-5min, -80°c长期保存,干冰运输。
水体:1、对于水质较为清澈的水样,用0.22μm 的微孔滤膜真空过滤水样(1 l左右),富集于无菌管中,液氮速冻3-5min,干冰运输。2、对于水质较为混浊的水样,三点水样混合摇匀后取60-80ml,液氮速冻3-5 min,-80℃保存,干冰运输。
皮肤:采用无菌棉签轻轻刮取皮肤表面,取样后将棉签置于无菌的离心管,液氮速冻3-5min,-80℃长期保存,干冰运输。
服务流程
1、提交项目课题相关需求和资料。
2、与我们的专业技术团队讨论项目细节。
3、根据讨论后的意见对实验方案进行修改。
4、双方均满意并达成一致,签订技术服务合同。
5、开展实验,按期完成合同规定的内容。
6、结题,提供实验原始结果和分析结果、实验流程、实验条件等等。
我们的优势
1、适用于单细胞、微量细胞样品。
2、数据质量高、偏差小、高度均一。
3、高通量,单个样本可达30-100x的测序深度和数据产出量。
4、*的覆盖度,能检测到90%以上的snp位点信息。
5、检测灵敏度和准确度高。
6、能够全面发掘新的和稀有的遗传变异
咨询与订购
感谢您选择我们的服务,如果您有任何问题,请联xi我们,我们将竭诚为您解答和服务。
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