材料和方法
病例的一般资料收集 2016 年 8 月-2018 年 8 月蚌埠医学院附属医院血液内科经细胞学、免疫学、细胞遗传学、分子生物学（micm）确诊的初发急性髓系白血病患者 108 例，其中男 61 例，女 47 例；中位年龄55（13-79）岁。依据 fab 分型标准：除去 1 例急性混合细胞白血病，其余 aml-m1 8 例，aml-m245 例，aml-m3 10 例，aml-m4 18 例，aml-m5 25 例，m6 1 例。
试剂与仪器
dna 提取试剂盒为上海源奇生物医药科技生物公司产品；引物合成为生工生物工程有限公司产品；pcr 试剂盒为日本 takara 公司产品；琼脂糖为上海百研生物科技公司产品；tae 为广州赛国生物科技公司产品；溴化乙锭为江苏凯基生物公司产品。低温高速离心机为美国 thermo 科技公司产品；lx-400 迷你离心机为海门市其林贝尔仪器制造有限公司产品；酶标仪为美国 biotek 仪器有限公司；pcr 仪为美国 applied biosystems 公司产品；水平式凝胶电泳槽及电泳仪均为上海 tanon科技公司产品；全自动凝胶成像系统为上海 tanon科技公司产品。基因组 dna 的制备按照 dna 抽提试剂盒说明书要求（上海源奇生物医药科技有限公司）提取基因组dna，测定吸光度，所有用于pcr的dna样本的od260/280比值均＞ 1.8，去离子水稀释基因组 dna 样品至 50-150 ng/μl。目的基因的 pcr 扩增根据 genbank 上目标基因序列，由生工生物工程（上海）股份有限公司合成：正义链：5′-gactgagtacaaactggtgg-3′，反义链：5′-tgcataactgaatgtataccc-3′，扩增产物长度 250bp；pcr 扩增的反应体系 50 μl：10×pcr buffer（mg2+）5 μl + dntp mixture 4 μl + 引物 f 0.5 μl+ 引物 r 0.5 μl + tap 酶 0.25 μl + dna 标本 2 μl，去离子水补足体积（pcr 试剂盒来自宝日医生物技术有限公司）。
结 果
nras 基因 pcr 扩增产物琼脂糖凝胶电泳结果及基因测序图列于图 1、图 2。108 例 aml 患者中发现，11 例有 nras 突变，其中 g12d 6 例、g13d 3例、g61k 2 例，突变率为 10.2%。108 例 aml 患者中 105 例有完整核型分析资料。10 例 nras 突变患者拥有可供分析的染色体核型，其中 4 例为正常核型，故其在正常核型中的突变率为 7.84%，与未突变组比较无明显差异（p＞ 0.05）。细胞遗传学高危、中危、低危患者分别 为 1 例、6 例 和 3 例， 所 占 比 分 别 为 12.5%、10.17%、4.55%。3 组间的统计学分析亦无明显差异（p＞ 0.05）。
讨 论
nras 基因编码是一种 21kd 的膜蛋白，其作为一种“分子开关”，位于细胞膜表面，可以将细胞外的信号转至细胞核，从而调节细胞的增殖、分化和凋亡 。而 nras 突变主要是集中在外显子 1、2 处涉及 12、13、61 密码子的错义突变，其作为目前*的致人 aml 的 2 类合作突变中的ⅰ类突变，赋予细胞增殖和生存优势，从而参与 aml的发生发展。
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