实验试剂:
100mm ganansuanph 2.5,1 m tris-hcl ph 9.0,20 mm 磷酸钠溶液(ph 7.0)、灭菌二级水、1×pbs、20% 乙醇
实验步骤:
1.将血清进行离心,10000rpm、4℃离心 5 分钟(两遍),将上清取出放入干净的 50 ml 离心管,丢弃沉淀。
2.从冰箱取出 proa 柱,室温放置几分钟。然后用 5 倍柱体积的二级水过柱,再用相同体积的 20mm 的磷酸钠溶液(ph7.0)平衡柱子。
3.将离心好的上清过 proa 柱。
4.待血清(余约 20ml)过柱完毕,用 10 倍柱体积的 20mm 的磷酸钠溶液(ph7.0)洗柱
5.在 15ml 收集管中预先加入 0.2 倍柱体积即 0.4ml 的 1m tris-hcl(ph9.0),然后用 4 倍柱体积即 8ml 的 100mm 的ganansuan(ph2.5)洗脱柱子,并收集洗脱液
6.洗脱完毕,立即颠倒管子,将洗脱液与中和液混匀
对柱子的处理是:先用 3 倍柱体积的 100mm ganansuan(ph2.5)洗柱子,然后依次用 5倍柱体积的 20mm 的磷酸钠溶液、5 倍柱体积的灭菌二级水、2 倍柱体积的 20%乙醇冲洗柱子,冲洗完毕后,再加入 2 倍柱体积的 20%的乙醇,盖紧底帽,4 度保存柱子。